(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210906340.5 (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 山东达因海 洋生物制药股份有限公 司 地址 264300 山东省威海市荣成市富源南 路18号 申请人 北京达因高科儿童药物研究院有限 公司 (72)发明人 侯慧杰　张俊杰　颜世强　蔡坤　 李亮亮　解春文　于晓燕　王文笙　 王英新　胡醒　 (74)专利代理 机构 济南圣达知识产权代理有限 公司 372 21 专利代理师 李筝(51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/74(2006.01) (54)发明名称 一种(S)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐的 HPLC-ELSD检测方法 (57)摘要 本发明涉及一种(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇 盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法。 本发明提供了一 种利奈唑胺原料中重要杂质(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑ 2‑丙醇盐酸盐的检测方法， 所述检测联合采用高 效液相色谱 ‑蒸发光检测器对样品进行检测， 以 十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱， 采用一 定比例的三氟乙酸水溶液及三氟酸乙腈溶液为 流动相， 进行梯度洗脱。 本方法能够有效分离和 测定利奈唑胺物料B中杂质(S)1 ‑氨基‑3‑氯‑2‑ 丙醇盐酸盐， 方法操作简便， 高效快捷。 权利要求书2页 说明书8页 附图2页 CN 115219632 A 2022.10.21 CN 115219632 A 1.一种(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在于， 所述方法 的色谱条件如下： 以十八烷基硅烷键合硅胶或柱效相当的色谱柱为固定相， 流动相A为三氟乙酸水溶液， 流动相B为 三氟乙酸乙腈溶 液， 通过梯度洗脱程序进行分离， 所述梯度洗脱程序如下： 初始比例， 流动相A为84～8 8％， 流动相B为12 ～16％； 0～10min， 流动相A为7 7～83％， 流动相B为17～ 23％； 10～25min， 流动相A为 45～55％， 流动相B为 45～55％； 25～30min， 流动相A为83～89％， 流动相B为1 1～17％。 2.如权利要求1所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述色谱柱采用反相色谱柱， 柱长为240～260mm， 柱径 为2.1～4.6mm， 填料粒径为4～6 μ m； 具体的， 所述色谱柱为 Waters Atlantis T3色谱柱； 另外， 所述色谱柱的柱温为25℃～3 5℃， 进一 步优选为3 0℃。 3.如权利要求1所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述流动相A为0.08～0.12％的三氟乙酸水 溶液； 或， 所述流动相B为0.08～0.12％的三氟乙酸乙腈溶 液； 具体的， 所述流动相A为0.1％的三氟乙酸水溶液， 所述流动相B为0.1％的三氟乙酸乙 腈溶液。 4.如权利要求1所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述洗脱程序如下： 初始比例， 流动相A为86％， 流动相B为14％； 0～10min， 流动相A为80％， 流动相B为20％； 10～25min， 流动相A为5 0％， 流动相B为5 0％； 25～30min， 流动相A为86％， 流动相B为14％。 5.如权利要求1所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述蒸发光检测器的检测条件如下： 检测器温度为3 0℃～70℃， 进一 步优选为 45～50℃， 具体的， 为5 0℃； 氮气流速： 1～ 2mL/min， 进一步优选为1.3ml/mi n～1.7ml/mi n； 具体的， 为1.5ml/mi n； 增益值： 0.5～1.5， 更优选为1.0 。 6.如权利要求1所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述检测方法还包括对供试品及对照品的处理， 采用乙腈溶液作为稀释剂进行供试品 及对照品的制备， 进一 步的， 所述乙腈溶 液的浓度为8～12％。 7.如权利要求6所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 所述检测方法的具体步骤如下： (1)供试品及对照品的制备： 称取待测 样品加入稀释剂作为供试品溶液， 精密称定(S) ‑ 1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐加入稀释剂作为对照品储 备液， 稀释该对照品储备液并配置成 一系列浓度， 作为线性溶 液； (2)基于所述HPLC ‑ELSD检测条件对所述线性溶液进行检测， 获得相应的色谱图， 以 (S)‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐浓度的自然对 数为变量建立峰面积的线性回归曲线； 在同权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115219632 A 2样的HPLC ‑ELSD参数下检测供试品溶液， 并通过所述线性回归曲线对 供试品中(S) ‑1‑氨基‑ 3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐浓度进行计算。 8.如权利要求7所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的HPLC ‑ELSD检测方法， 其特征在 于， 步骤(2)中， 所述线性回归曲线的相关系数应当不小于 0.99。 9.一种利奈 唑胺的质量控制方法， 其特征在于， 所述方法用于对利奈 唑胺中(S) ‑1‑氨 基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐杂质的含量进行质量控制， 所述检测通过HPLC ‑ELSD进行， 包含权利 要求1‑8任一项所述(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的检测步骤。 10.如权利要求9所述利奈唑胺的质量控制方法， 其特征在于， 所述质量控制方法中， 利 奈唑胺供试品溶液或对照品储备液的浓度依据仪器的检测限、 利奈唑胺原料中杂质含量因 素进行调整； 进一步的， 所述供试品溶液或对照品储备液， 每1mL稀释液中含2～3mg的供试 品或对照品； 或， 所述线性溶液中(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐的线性梯度覆盖利奈唑胺供试品 中杂质含量的上限及下限； 具体的， 所述线性溶液的设置方式如每1mL中含杂质(S) ‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐 18 μg、 48 μg、 6 0 μg、 72 μg和120 μg。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115219632 A 3