(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211036301.0 (22)申请日 2022.08.28 (71)申请人 武汉轻工大 学 地址 430023 湖北省武汉市东西湖区常青 花园学府南路68号 (72)发明人 叶纯　邱银生　吴仲元　刘宇　 付书林　程先忠　陈蓉　赵鸣　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/74(2006.01) (54)发明名称 一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的 方法 (57)摘要 本发明公开了一种HPLC法测定黄芩苷金属 配合物含量的方法， 该方法以磷酸水溶液与乙腈 的混合液为提取液， 提取液对黄芩苷金属配合物 的溶解性好， 能够最大限度将 黄芩苷金属配合物 提取出来并完全分解成黄芩苷； 再以C18色谱柱， 磷酸水为水相， 乙腈为有机相作为流动相， 黄芩 苷为对照品， 进行色谱分析。 方法操作 简单， 测量 准确， 可重复性好， 可以实现对黄芩苷金属配合 物及其制剂的质量控制。 权利要求书1页 说明书7页 附图2页 CN 115326984 A 2022.11.11 CN 115326984 A 1.一种HPLC法测定 黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： （1） 称取黄芩苷金属配合物或其制剂， 加入提取溶液超声溶解、 过滤， 得到黄芩苷金属 配合物或其制剂中的主成分溶 液； （2） 将上述溶液用C18色谱柱， 0.05%磷酸溶液为水相与乙腈为有机相的溶液为流动相， 流速为1.0  ml/min， 柱温为30℃， 检测 波长为278  nm， 进行色谱分析； 所述提取溶液为磷酸 水溶液与乙腈体积比为7： 3混合液， 所述磷酸水溶液的磷酸体积分数为0.05%， 所述C18色谱 柱的规格为 4.6mm  ×  150 mm、 5 μm。 2.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述提取液为0.05%磷酸水： 乙腈体积比为7： 3 。 3.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述溶解方式为超声边溶解至溶解完全。 4.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述超声溶解时间为20～3 0 min， 功率40 KHz， 温度为室温。 5.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 所述检测波长 优选为278  nm。 6.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述流动相中水相： 有机相的体积比为7： 3～6： 4， 其中水相为0.05%磷酸水溶液， 有机相为乙 腈。 7.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述色谱柱为C18柱， 其长度为15 0 mm， 还可为25 0 mm。 8.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述黄芩苷金属配合物为黄 芩苷铝， 其还可为黄 芩苷锌、 黄 芩苷铜等。 9.根据权利要求1所述一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方法， 其特征在于， 所 述含黄芩苷金属配合物的制剂为黄芩苷铝干混悬剂和预混剂， 还可以为黄芩苷锌等其他配 合物的制剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115326984 A 2一种HPLC法测定黄芩苷金属配合物含量的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及药物检测技术领域， 具体涉及一种高效液相色谱 （HP LC） 法测定黄芩苷 金属配合物含量的方法。 背景技术 [0002]黄芩苷铝是由黄芩苷和铝盐合成制成的黄芩苷金属配合物类药物， 主要作用于肠 道， 具有抑菌抗炎， 收敛止涩的功能。 目前已有剂型干混悬剂和预混剂， 用于仔猪细菌性腹 泻等肠道疾病的治疗。 黄芩苷铝为 目前市售的药品黄芩素铝胶囊的主要活性成分， 该药物 主要用于治疗人的肠炎和痢疾。 [0003]目前尚没有报道黄芩苷铝含量的测定方法。 黄芩素铝胶囊执行的为部颁标准中药 成方制剂第七册WS3‑B‑1425‑93， 标准内容仅有鉴别与检查， 无含量测定项。 目前仅有黄芩 苷锌的测定方法相关报道， 其与黄芩苷铝同为黄芩苷金属配合物。 含量测定方法主要有原 子吸收分光光度法、 EDTA滴定法和液相色谱法。 原子吸收分光光度法和EDTA滴定法测 定的 是黄芩苷锌中锌的含量， 两种 方法需经过复杂的前处理 （炭化后灰化， 操作时间长， 样品损 失严重） ， 致使测定结果误差较大； 液相色谱法以自制的黄芩苷锌做对照品， 在加热条件下 以甲醇溶解样品后， 稀释过滤， 采用LiChrospher （4.6mm   × 250 mm， 5 μm） 色谱柱， 以甲醇 ‑ 水‑0.10％磷酸溶液 （47： 53： 0.2） 为流动相， 在278  nm波长下测定黄芩苷锌的含量， 但该条 件下黄芩苷与黄芩苷锌出峰时间仅相差0.03  min， 无法完全分离开， 黄芩苷锌紫外吸收不 强， 灵敏度低， 黄芩苷锌对照品为自制的无市售标准品， 标定准确度有待商确， 该方法难以 推广， 以上均会导致含量测定结果不准确。 因此， 亟需一种操作简单， 测量准确， 可重复性好 的， 有效测定黄芩苷铝及其制剂含量的方法， 该方法可用于黄芩苷铝和含有黄芩苷铝成分 的药物含量分析。 发明内容 [0004]针对目前黄芩苷金属配合物及其制剂的含量测定时， 无法准确测定黄芩苷金属配 合物及其制剂含量的情况， 因此， 本发明的目的在于提供一种HPLC法测 定黄芩苷金属配合 物含量的方法， 为该类化合物产品的质量控制提供检测方法， 该方法对照品易得， 操作简 单， 专属性 好， 灵敏度高， 测量 准确， 可重复性 好。 [0005]为达到上述目的， 本 发明提供一种技术方案， 具体步骤如下： 称取黄芩苷金属配合 物或其制剂， 加入提取溶液超声 溶解、 过滤， 得到黄芩苷金属配合物或其制剂中的主成分溶 液， 然后将上述溶液用C18色谱柱， 0.05%磷酸溶液为水相与乙腈为有机相的溶液为流动相， 流速为1.0  ml/min， 柱温为30℃， 检测 波长为278  nm， 进行色谱分析； 所述提取溶液为磷酸 水溶液与乙腈体积比为7： 3混合液， 所述磷酸水溶液的磷酸体积分数为0.05%， C18色谱柱的 规格为4.6mm  ×  150 mm， 5 μm。 [0006]优选的， 所述 提取液为0.05%磷酸水： 乙腈体积比为7： 3 。 [0007]优选的， 所述溶解方式为超声边溶解至溶解完全。说　明　书 1/7 页 3 CN 115326984 A 3