(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211407393.9 (22)申请日 2022.11.10 (71)申请人 中国科学院昆明植物研究所 地址 650000 云南省昆明市北郊黑龙潭 (72)发明人 何华杰　秦少发　亚吉东　黄莉　 方云花　郭云刚　谭治刚　张荣桢　 李涟漪　蔡杰　 (74)专利代理 机构 昆明盛鼎宏图知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 53203 专利代理师 许竞雄 (51)Int.Cl. G01N 21/84(2006.01) G01N 1/38(2006.01) G06T 7/00(2017.01) (54)发明名称 一种快速 检测兰科种子 饱满率的方法 (57)摘要 本发明公开了一种快速检测兰科种子饱满 率的方法， 包括有如下步骤： 取样； 预处理； 显微 镜下镜检； 饱满率检测； 回收种子； 其中， 显微镜 下镜检时采用冷光源从种子下方向上透射冷光 源； 解决了 萌发检测或TZ染色检测饱满率的难度 大、 周期长等问题， 本发明提供的检测方法能够 快速、 简便、 高效、 准确的检测兰科种子饱满率， 且本方法检测的兰科种子未受损， 可继续萌发或 长期保存等使用； 效果显著； 为兰科种子饱满率 的快速检测开辟了一条全新的技 术路线。 权利要求书1页 说明书9页 附图4页 CN 115524331 A 2022.12.27 CN 115524331 A 1.一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于， 包括有如下步骤： 取样； 预处理； 显微镜下镜检； 饱满率检测； 回收种子； 其中， 显微镜下镜检时采用冷光源从种子下方向上 透射冷光源； 所述预处理步骤为， 将种子样本放在显微镜底盘或载玻片上， 向显微镜底盘或载玻片 上滴加生理盐水， 静置2 ‑3min至种子浸湿， 得待测样品； 所述显微镜下镜检步骤为， 将待测样品放置在显微镜载物台上， 打开下方的冷光源， 选 择放大倍数， 调节焦距至种子形态 清楚。 2.根据权利要求1所述的一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于： 所述取样 步骤为， 将种子放入取样盘内充分摇匀后， 随机抽取2～4个种子样本， 每个种子样本80～ 100粒种子。 3.根据权利要求1所述的一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于： 所述冷光 源功率为30～50W， 色温320 0～6500K， 光照度5 0000～120000Lx。 4.根据权利要求1所述的一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于： 所述饱满 率检测步骤为， 计数一个样品中检测种子数、 饱满种子数和空瘪种子数， 并根据下式 （ Ⅰ） 计 算种子饱满率： （Ⅰ） 。 5.根据权利要求1所述的一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于： 所述取样 步骤前， 还 包括有果实采集 步骤。 6.根据权利要求5所述的一种快速检测兰科种子饱满率的方法， 其特征在于： 所述果实 采集的时机为蒴果即将开裂时或种子刚开始散布时。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115524331 A 2一种快速检测兰科种子饱满率的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及种质 资源保藏技术领域， 特别是一种快速检测兰科种子饱满率的方 法。 背景技术 [0002]根据 《Flor a of China》 及相关文献记载， 兰科有27500多种， 我国有1723种。 该科 有许多种具有重要的观赏价值和药用价值， 涉及艺术、 文化、 经济、 医疗和日常生活的诸多 方面。 例如国兰， 作为中国重要的传统兰花名品， 深受国人喜爱； 兜兰属 （Paphiopedilum） 植 物花期长， 是优良的花卉种质资源； 石斛属 （Dendrobium） 植物均具较高的药用价值， 其中石 斛 （Dendrobium nobile） 是 《中华人民共和国药典》 记载的一种极为珍稀名贵的中药材， 它 不仅是脉络宁注射液的必需原料， 还是数种中成药及保健品的有效组成部分； 铁皮石斛 （Dendrobium  officinale） 是中国重要 的珍稀濒危药用植物资源， 其茎入药， 具有清热滋 阴、 润肺生津、 益肾养胃、 明目等功效。 [0003]然而， 由于兰科植物的生活史中与共生真菌形成密切 关系， 使得兰科植物的繁衍 对生境要求十 分苛刻； 同时， 兰科植物的繁殖对其他生物 （如传 粉动物） 的依赖性 强， 这些特 点使得兰科植物对人类干扰和环境十分敏感。 且由于其珍贵的观赏和药用价值， 人为采挖 严重， 使其野生资源日益减少。 上述各种复杂的原因最终导致 目前很多兰科植物整体处于 濒临灭绝的境地。 已经明确的主要致濒致危因素是栖息地的过度开发与利用。 在现有的兰 科植物保护方法中， 迁地保护被认为是最有效的方法之一， 而种子库是最经济最有效的迁 地保护方法之一， 其最重要的前提条件是获得健康饱满的种子， 因此寻找一种快速、 高效、 准确检测兰科种子 饱满率和质量状况的方法就尤为重要了 。 [0004]种子是兰科物种多样性保护和种质长期保存的重要材料， 对其种子的储藏特性和 种子长期保存方式进行系统的研究显得尤为重要， 无论是种质资源收集保存、 种子生物学 研究、 还是就地保护、 迁地保护和研究利用等， 都需要收集保存大量的兰科种子， 在有限的 空间中尽量保存较多的高质量种子是十分重要的。 [0005]但传统方式种子质量检测 （萌发检测或TZ染色） 难度大周期长， 萌发极其困难， TZ 染色率很难准确判断， 因此急需寻找到一种适合检测兰科种子饱满率快速、 准确的方法， 解 决在兰科种子收集、 清理、 萌发和保存过程中， 种子质量状况问题。 但与此同时， 采用直接肉 眼观察兰科种子形态是否饱满以检测种子质量是不现实的， 因为兰科种子是世界上已知最 小的种子， 大多细如粉尘， 如斑叶兰， 它的5万粒种子只有0.025g重， 1亿粒斑叶兰种子才50g 重； 它的种子长约110 μm， 重约0.5 μg， 对于如此微小的种子， 即使在显微镜下进行观察也往 往不能清楚呈现种子的内部状态导 致检测种子是否 饱满存在难度。 [0006]因而， 探寻一种适用于兰科种子的快速检测其饱满率的方法对于其种子的长期保 存、 建立兰科种质资源库和完 善兰科种质资源保存体系具 备重要的意 义。说　明　书 1/9 页 3 CN 115524331 A 3