(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210766907.3 (22)申请日 2022.06.30 (71)申请人 湖南家辉生物技 术有限公司 地址 410205 湖南省长 沙市高新 开发区麓 谷麓景路2号 (72)发明人 曾桥　刘亚宁　伊宁　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 苏士莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于诊断威尔逊病的生物标志物、 扩增 引物组、 检测试剂及应用 (57)摘要 本发明属于医学诊断技术领域， 具体涉及一 种用于诊断威尔逊病的生物标志物、 扩增引物 组、 检测试剂及应用。 本发明所述生物标志物为 ATP7B突变基因， 突变位点包括c.2384T>C和 c.4005delG。 本发明所述ATP7B突变基因可以导 致威尔逊病发病， 丰富了威尔逊病的致病突变 谱， 通过检测受试者是否携带有上述突变， 能够 筛查或诊断威尔逊病的致病基因突变携带者或 患者， 以提供优生优育和治疗干预指导， 为威尔 逊病患者的治疗提供全新的理论依据， 可以为治 疗威尔逊病提供 可能的药物靶点。 权利要求书2页 说明书16页 序列表11页 附图3页 CN 115216533 A 2022.10.21 CN 115216533 A 1.一种用于诊断威尔逊病的生物标志物， 其特征在于， 所述生物标志物为ATP7B突变基 因， 突变位 点包括c.2384T>C和c.40 05delG。 2.一种用于扩增权利要求1所述ATP7B突变基因的引物组， 其特征在于， 包括引物组1和 引物组2； 所述引物组1包括上游引物 ATP7B‑1F和下游引物 ATP7B‑1R； 所述引物组2包括上游引物 ATP7B‑2F和下游引物 ATP7B‑2R； 所述上游引物 ATP7B‑1F包括如a1)～a4)中的任意 一种： a1)序列表中SEQ  ID NO.1所述的单链DNA； a2)在a1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； a3)在a1)或a2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 ATP7B‑1R包括如b1)～b4)中的任意 一种： b1)序列表中SEQ  ID NO.2所述的单链DNA； b2)在b1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； b3)在b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述上游引物 ATP7B‑2F包括如c1)～c4)中的任意 一种： c1)序列表中SEQ  ID NO.31所述的单链DNA； c2)在c1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； c3)在c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 ATP7B‑2R包括如d1)～d4)中的任意 一种： d1)序列表中SEQ  ID NO.32所述的单链DNA； d2)在d1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； d3)在d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。 3.权利要求2所述引物组在制备诊断威尔逊病的试剂中的应用。 4.一种诊断威尔逊病的试剂， 其特征在于， 所述试剂包括权利要求2所述的引物组和测 序引物组。 5.根据权利要求 4所述的试剂， 其特 征在于， 所述测序引物组包括测序引物组1和2； 所述测序引物组1包括上游引物 ATP7B‑Seq1F和下游引物 ATP7B‑Seq1R； 所述测序引物组2包括上游引物 ATP7B‑Seq2F和下游引物 ATP7B‑Seq2R； 所述上游引物 ATP7B‑Seq1F包括如e1)～e4)中的任意 一种： e1)序列表中SEQ  ID NO.61所述的单链DNA； e2)在e1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； e3)在e1)或e2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； e4)在严格条件下与e1)或e2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 ATP7B‑Seq1R包括如f1)～f4)中的任意 一种： f1)序列表中SEQ  ID NO.62所述的单链DNA；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115216533 A 2f2)在f1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； f3)在f1)或f2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； f4)在严格条件下与f1)或f2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述上游引物 ATP7B‑Seq2F包括如g1)～g4)中的任意 一种： g1)序列表中SEQ  ID NO.63所述的单链DNA； g2)在g1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； g3)在g1)或g2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； g4)在严格条件下与g1)或g2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 ATP7B‑Seq2R包括如h1)～h4)中的任意 一种： h1)序列表中SEQ  ID NO.64所述的单链DNA； h2)在h1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； h3)在h1)或h2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； h4)在严格条件下与h1)或h2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。 6.根据权利要求4或5所述的试剂， 其特征在于， 所述试剂还包括dNTP， PCR缓冲液， 镁离 子和Tap聚合酶中的一种或多种。 7.权利要求2所述的引物组或权利要求4～6任一项所述的试剂在制备预防和/或诊断 威尔逊病的试剂盒中的应用。 8.权利要求2所述的引物组或权利要求4～6任一项所述的试剂在制备辅助治疗威尔逊 病的试剂盒中的应用。 9.权利要求2所述的引物组或权利要求4～6任一项所述的试剂在制备孕前和/或产前 遗传病筛查和/或诊断试剂盒中的应用。 10.一种诊断威尔逊病的试剂盒， 其特 征在于， 包括权利要求 4～6任一项所述的试剂。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115216533 A 3