(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210765942.3 (22)申请日 2022.06.30 (71)申请人 湖南家辉生物技 术有限公司 地址 410205 湖南省长 沙市高新 开发区麓 谷麓景路2号 (72)发明人 曾桥　罗娇娇　刘亚宁　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 苏士莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于诊断家族性腺瘤性息肉病的APC突 变基因、 扩增引物及应用 (57)摘要 本发明属于属于医学诊断技术领域， 具体涉 及一种用于诊断家族性腺瘤性息肉病的APC突变 基因、 扩增引物及应用。 本发明所述用于诊断家 族性腺瘤性息肉病的APC突变基因的突变位点为 c.2143_2144insG， 具体为APC基因2143和2144 之 间插入碱基G， 导致APC基因所编码的蛋白质第 715位氨基酸残基由H变为A， 后续并发生移码突 变(APC:NM_000038 .5:exon16:c .2143_ 2144insG:p.H 715Afs*19)， 影响了蛋白的重要功 能。 本发明所述APC突变基因可以作为诊断家族 性腺瘤性息肉病的生物标志物， 为治疗家族性腺 瘤性息肉病提供 可能的药物靶点。 权利要求书2页 说明书16页 序列表7页 附图6页 CN 115369162 A 2022.11.22 CN 115369162 A 1.一种用于诊断家族性腺瘤性息肉病的APC突变基因， 其特征在于， 所述APC突变基因 的突变位 点包括c.2143_214 4insG。 2.权利要求1所述APC突变 基因作为检测靶标在下述A1 ‑A6任一种中的应用： A1： 制备诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂； A2： 制备预防家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； A3： 制备检测家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； A4： 制备诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； A5： 制备辅助治疗家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； A6： 制备孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒。 3.一种用于扩增权利要求1所述APC突变基因的引物， 其特征在于， 包括序列上游引物 APC‑F和下游引物 APC‑R； 所述上游引物 APC‑F包括如a1)～a4)中的任意 一种： a1)序列表中SEQ  ID NO.1所述的单链DNA； a2)在a1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； a3)在a1)或a2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 APC‑R包括如b1)～b4)中的任意 一种： b1)序列表中SEQ  ID NO.2所述的单链DNA； b2)在b1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； b3)在b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。 4.权利要求3所述引物在下述B1 ‑B6任一种中的应用： B1： 制备诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂； B2： 制备预防家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； B3： 制备检测家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； B4： 制备诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； B5： 制备辅助治疗家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； B6： 制备孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒。 5.一种诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂， 其特征在于， 所述试剂包括权利要求3所述的 引物和测序引物。 6.根据权利 要求5所述的试剂， 其特征在于， 所述测序引物包括上游引物APC ‑SeqF和下 游引物APC‑SeqR； 所述上游引物 APC‑SeqF包括如c1)～c4)中的任意 一种： c1)序列表中SEQ  ID NO.25所述的单链DNA； c2)在c1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； c3)在c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA； 所述下游引物 APC‑SeqR包括如d1)～d4)中的任意 一种： d1)序列表中SEQ  ID NO.26所述的单链DNA；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115369162 A 2d2)在d1)的5 ’端和/或3 ’端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA； d3)在d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一 性的单链DNA； d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。 7.根据权利 要求5或6所述的试剂， 其特征在于， 所述试剂还包括dNTP， PCR缓冲液和Tap 聚合酶中的一种或多种。 8.根据权利要求7所述的试剂， 其特征在于， 所述PCR缓冲液包括50mmol/LKCl、 10mmol/ LpH8.3的Tris ‑HCl和1.5m mol/LMgCl2。 9.权利要求5～8任一项所述的试剂在下述C1 ‑C5任一种中的应用： C1： 制备预防家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； C2： 制备检测家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； C3： 制备诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； C4： 制备辅助治疗家族性腺瘤性息肉病的试剂盒； C5： 制备孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒。 10.一种诊断家族性腺瘤性息肉病的试剂 盒， 其特征在于， 包括权利要求5～7任一项所 述的试剂。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115369162 A 3