(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210587917.0 (22)申请日 2022.05.26 (71)申请人 北京爱普益 生物科技有限公司 地址 100174 北京市大兴区北京经济技 术 开发区地盛东路1号院爱普益大厦 (72)发明人 潘雅姣　王颖希　薛建　曲保旺　 陈朝辉　李鑫　邱笑违　 (74)专利代理 机构 北京圣州专利代理事务所 (普通合伙) 11818 专利代理师 李志强 (51)Int.Cl. C12Q 1/6869(2018.01) C12Q 1/6806(2018.01) C12Q 1/6876(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试 剂盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种兼容多种测序平台的高 通量测序STR检测试剂盒， 试剂盒包括但不限于 PCR扩增缓冲液、 dNTP、 DNA聚合酶， 还包 括第一次 PCR融合引物和第二次PCR融合引物； 所述第一次 PCR融合引物的上游引物结构为依次连接的 Read1、 样本标签一、 目的片段特异上游引物， 其 下游引物结构为依次连接的A 接头、 样本标签二、 目的片段特异下游引物。 本发明采用上述的一种 兼容多种测序平台的高通量测序S TR检测试剂盒 及其应用， 可 以兼容多种测序平台， 具有高分辨 力、 高准确性、 高通 量的特点。 权利要求书2页 说明书12页 序列表9页 附图3页 CN 115029425 A 2022.09.09 CN 115029425 A 1.一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征在于： 试剂盒包括但不 限于PCR扩增缓冲液、 dNTP、 DNA聚合酶， 还 包括第一次PCR融合引物和第二次PCR融合引物； 所述第一次PCR融合引物的上游引物结构为依次连接的Read1、 样本标签一、 目的片段 特异上游引物， 其下游引物结构为依次连接的A接 头、 样本标签二、 目的片段 特异下游引物； 所述第二次PCR融合引 物的上游引 物结构为依次连接 的P5接头、 P接头、 Read1， 其下游 引物结构为依次连接的P7接 头、 A接头。 2.根据权利要求1所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征 在于： Read1的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示， A接 头的核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 3.根据权利要求1所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征 在于： P5接头的核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示， P接头的核苷酸序列如SEQ  ID NO.4所示， P7接头的核苷酸序列如SEQ  ID NO.5所示。 4.根据权利要求1所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征 在于： 目的片段特异上游引物和目的片段特异下游引物 为以下(1) ‑(24)中的任意一组或多 组； (1)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.6和SEQ  ID NO.7所示； (2)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.8和SEQ  ID NO.9所示； (3)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.10和SEQ  ID NO.11所示； (4)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.12和SEQ  ID NO.13所示； (5)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.14和SEQ  ID NO.15所示； (6)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.16和SEQ  ID NO.17所示； (7)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.18和SEQ  ID NO.19所示； (8)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.20和SEQ  ID NO.21所示； (9)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.22和SEQ ID NO.23所示； (10)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.24和SEQ  ID NO.25所示； (11)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.26和SEQ  ID NO.27所示； (12)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.28和SEQ  ID NO.29所示； (13)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.30和SEQ ID NO.31所示； (14)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.32和SEQ  ID NO.33所示； (15)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.34和SEQ  ID NO.35所示； (16)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.36和SEQ ID NO.37所示； (17)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.38和SEQ  ID NO.39所示； (18)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.40和SEQ  ID NO.41所示； (19)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.42和SEQ  ID NO.43所示； (20)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.44和SEQ ID NO.45所示； (21)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.46和SEQ  ID NO.47所示； (22)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.48和SEQ  ID NO.49所示； (23)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.50和SEQ ID NO.51所示； (24)所述引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.52和SEQ  ID NO.53所示。 5.根据权利要求4所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115029425 A 2在于： 目的片段特异引物对(1)的浓度为0.01 ‑0.2 μM， 目的片段特异引物对(2) ‑(13)的浓度 为0.01‑0.05μM， 目的片段特异引物对(14)的浓度为0.01 ‑0.06μM， 目的片段特异引物对 (15)‑(24)的浓度为0.02 ‑0.1 μM。 6.根据权利要求1所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征 在于： 样本标签一 为如下(a ‑l)任一项所示的核苷酸序列： a、 TCGCCTTA； b、 CTAGTACG； c、 TTCTGCCT； dGCTCAGGA； e、 AGGAGTCC； f、 CATGCCTA； g、 CTAGAGAG； h、 C CTCTCTG； i、 CAGC CTCG； j、 TGC CTCTT； k、 TCCTCTAC； l、 TCATGAGC 。 7.根据权利要求1所述的一种兼容多种测序平台的高通量测序STR检测试剂盒， 其特征 在于： 样本标签二 为如下①‑⑧任一项所示的核苷酸序列： ①ACTTGTTCGA； ②ATCCGCCGTA； ③ATCCGTTCGA； ④ATGGCGGTCA； ⑤CAGGTGGCTA； ⑥ CTAAGTTGCA；⑦CGTTAGGTCA；⑧TCGGACCGTA。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115029425 A 3