(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210727470.2 (22)申请日 2022.06.24 (71)申请人 贵州省园艺研究所 （贵州省园艺工 程技术研究中心） 地址 550006 贵州省贵阳市花溪区金竹镇 金欣社区金农路1号贵州省农业科学 院内 (72)发明人 付文苑　邓英　唐兵　滕九翠　 王青青　王天文　陶莲　杨巍　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 高辉 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/686(2018.01) (54)发明名称 叶用芥菜叶缘裂刻S SR分子标记及其应用 (57)摘要 本发明提供了叶用芥菜叶缘裂刻SSR分子标 记引物对及其应用， 属于分子标记开发技术领 域。 本发明还提供了鉴定叶用芥菜叶缘裂刻性状 的方法和叶用芥菜叶缘裂刻检测试剂盒及其应 用， 通过叶用芥菜叶缘裂刻SSR分子标记引物对 对叶用芥菜基因组DNA进行扩增， 检测标记位点 的多态性， 以精准表达叶用芥菜叶缘裂刻性状， 为叶用芥菜分子辅助育种提供指导， 满足生产上 的需求。 权利要求书1页 说明书11页 序列表24页 附图5页 CN 114875173 A 2022.08.09 CN 114875173 A 1.叶用芥菜叶缘裂刻SSR分子标记引物对， 其特征在于， 所述引物对的上游引物核苷酸 序列如SEQ  ID NO.1所示， 下游引物核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 2.根据权利要求1所述的引物对， 其特征在于， 所述引物对的扩增位点位于芥菜A亚基 因组10号染色体上。 3.一种鉴定叶用芥菜叶缘裂刻性状的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 提取叶用芥菜 基因组DNA， 利用权利要求1所述引物对进行PCR扩增， 扩增产物进行凝胶电泳， 观察电泳条 带的多态性。 4.根据权利要求2所述的方法， 其特 征在于， 对所述电泳条 带进行银染显影。 5.一种叶用芥菜叶缘裂刻检测试剂盒， 其特征在于， 包括权利要求1所述SSR标记引物 对。 6.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒还包括dNTPs、 Taq  DNA聚合 酶、 PCR反应缓冲液和基因 组提取试剂。 7.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特 征在于， 所述试剂盒还 包括凝胶电泳中的试剂。 8.权利要求1所述引物对或权利要求5～7任意一项所述试剂 盒在叶用芥菜叶缘裂刻性 状筛选中的应用。 9.权利要求1所述引物对或权利要求5～7任意一项所述试剂 盒在叶用芥菜 品种纯度鉴 定中的应用。 10.权利要求1所述引物对或权利要求5～7任意一项所述试剂盒在叶用芥菜育种 中的 应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114875173 A 2叶用芥菜叶缘裂刻S SR分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子标记开发技术领域， 具体涉及叶用芥菜叶缘裂刻SSR分子标记及 其应用。 背景技术 [0002]芥菜(Brassica  juncea(L.)Czern.et  Coss.)是贵州省的特色蔬菜， 栽培面积大， 春季栽培价格高。 叶用芥菜俗称青菜， 是十字花科芸薹属芥菜类蔬菜， 可鲜食可加工。 叶片 是植物的重要器官， 尤其在多叶蔬菜中叶片不仅是光合产物的主要来源， 其形态更是对叶 用类蔬菜的商品价值和产量有极大 的影响。 叶片形态根据叶的边缘形态的不同， 主要分为 全缘的、 锯齿状的和裂刻的。 研究表明叶缘裂刻是植物对逆境的一种较强的适应， 能够应对 冷害胁迫、 水分胁迫、 强风， 抵御高温同时增加通风透气性。 裂叶植物在密植时传热速率要 高于全缘叶植物， 可防御高温灼伤， 且在光资源竞争上竞争力比全缘叶更强， 裂叶在种群中 因为叶面积小， 且没有叶片复合聚集， 能快速响应和竞争有限光源， 所以可充分地利用光 能， 与全缘叶相比具有更高的光合效率和植物产量。 叶缘裂刻性状由1对显性基因控制， 目 前关于叶缘裂刻形成机理在白菜和甘蓝型油菜中研究较多， 在芥菜中鲜有报道。 叶用芥菜 品种选育在贵州省起步较晚， 尤其是叶缘裂刻品种选育。 因此， 以控制叶用芥菜叶缘裂刻性 状基因的相关的分子标记的开发和利用， 将为叶用芥菜新品种分子辅助育种提供指导， 满 足生产上的需求。 发明内容 [0003]为了解决现有技术中存在的问题， 本发明的目的在于提供 叶用芥菜叶缘裂刻SSR 分子标记引物对， 利用分子标记鉴定叶用芥菜叶缘裂刻性状， 为叶用芥菜新品种分子辅助 育种提供指导。 [0004]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0005]本发明提供了叶用芥菜叶缘裂刻SSR分子标记引物对， 所述引物对的上游引物核 苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 下游引物核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 [0006]优选的， 所述引物对的扩增位 点位于芥菜A亚基因 组10号染色体上。 [0007]本发明提供了一种鉴定叶用芥菜叶缘裂刻性状的方法， 包括以下步骤： 提取 叶用 芥菜基因组DNA， 利用上述引物对进 行PCR扩增， 扩增产 物进行凝胶电泳， 观 察电泳条带的多 态性。 [0008]优选的， 对所述电泳条 带进行银染显影。 [0009]本发明提供了一种叶用芥菜叶缘裂刻检测试剂盒， 包括上述S SR标记引物对。 [0010]优选的， 所述试剂盒还包括dNTPs、 Taq  DNA聚合酶、 PCR反应缓冲液和 基因组提取 试剂。 [0011]优选的， 所述试剂盒还 包括凝胶电泳中的试剂。 [0012]本发明提供了上述引物对或上述试剂盒在叶用芥菜叶缘裂刻性状筛 选中的应用。说　明　书 1/11 页 3 CN 114875173 A 3