(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210623673.7 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 西北农林科技大 学 地址 712100 陕西省咸阳市杨凌区 邰城路3 号 (72)发明人 毛虎德　康振生　梅方明　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 苏士莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 小麦TaDTG6基因与抗旱性相关的单体型及 其分子标记和应用 (57)摘要 本发明提供了小麦TaDTG6基因与抗旱性相 关的单体型及其分子标记和应用， 涉及基因检测 技术领域。 本发明通过对210个小麦品种组成的 自然变异群体中与抗旱性相关的基因TaDTG6遗 传变异分析， 找到了形成小麦不同抗旱性的所述 多态性位点(InDel5 74)， 该多态性位点仅存在两 种单体型。 实验证明， 通过检测所述多态性位点 的情况， 即可找到抗旱性相对较高的小麦。 本发 明为小麦的分子标记辅助选择育种提供了一个 新方法， 在培育抗旱小麦品种或研究中具有重要 意义。 权利要求书2页 说明书20页 序列表6页 附图5页 CN 114774579 A 2022.07.22 CN 114774579 A 1.一种基于多态性位点预测小麦抗旱性的引物组合， 其特征在于， 所述多态性位点位 于SEQ ID No.1所示序列自5 ’末端的第2 964～2989位； 所述引物组合包括核苷酸序列如SEQ  ID No.4～7所示的引物。 2.根据权利要求1所述引物组合， 其特征在于， 在所述多态性位点包括无碱基插入和插 入SEQ ID No.3所示的序列。 3.根据权利要求1或2所述引物 组合， 其特征在于， 在所述多态性位点产生三种基因型， 其中单体型 甲纯合基因型为在等位基因的所述多态性位点处无碱基插入/无碱基插入； 单 体型乙纯合基因型为在等位基因的多态性位点处插入SEQ  ID No.3所示的序列/插入SEQ   ID No.3所示的序列； 单体型甲和乙杂合基因型为在等位基因的多态性位点处无碱基插入/ 插入SEQ ID No.3所示的序列。 4.一种利用权利要求1～3任一项所述引物组合鉴定和/或辅助鉴定小麦抗旱性的方 法， 其特征在于， 包括以下步骤： 以小麦基因组DNA为模板， 利用SEQ  ID No.4～5所示的引物 对进行第一扩增， 得第一扩增产物； 以第一扩增产物为模板， 利用SEQ  ID No.6～7所示的引物对进行第二扩增， 得第二扩 增产物； 当所述第二扩增产物的长度为18 8bp时， 判定小麦为单体型甲纯合基因型； 当所述第二扩增产物的长度为214bp时， 判定小麦为单体型乙纯合基因型； 当所述第二扩增产物的长度为188bp和214bp时， 判定小麦为单体型甲和乙杂合基因 型； 单体型甲纯合基因型的抗 旱性优于单体型乙纯合基因型和单体型甲和乙杂合基因型。 5.根据权利 要求4所述方法， 其特征在于， 所述第一扩增的程序包括： 94℃预变性5min； 94℃变性3 0s， 58℃退火3 0s， 72℃延伸1mi n， 40循环； 72℃再延伸5mi n； 所述第二扩增的程序包括： 94℃预变性5min； 94℃变性30s， 58℃退火30s， 72℃延伸 30s， 40循环； 72℃再延伸5mi n。 6.包含多态性位点的DNA分子或DNA片段在调控小麦抗旱性中的应用， 其特征在于， 所 述多态性 位点位于SEQ ID No.1所示序列自5 ’末端的第2 964～2989位。 7.根据权利要求6所述应用， 其特征在于， 所述DNA分子或DNA片段包括以下DNA片段的 任意一种： a).小麦基因组DNA上的任意一段含有SEQ  ID No.1所示自5 ’末端第2390～3031 位核苷酸的DNA片段或DNA分子； b).小麦基因组DNA上的任意一段含有SEQ  ID No.1所示自5 ’末端第2390～3137位核苷 酸的DNA片段或DNA分子； c).与a)或b)所述的DNA片段或DNA分子具有至少70％同源性的DNA片段或DNA分子； d).与a)、 b)或c)所述的DNA片段或DNA分子杂交的DNA片段或DNA分子 。 8.一种鉴定小麦抗旱性种质的方法， 其特征在于， 包括以待测小麦基因组DNA为模板， 利用SEQ ID No.4～5所示的引物对进行第一扩增， 得第一扩增产物； 以第一扩增产物为模板， 利用SEQ  ID No.6～7所示的引物对进行第二扩增， 得第二扩 增产物； 当所述第二扩增产物的长度为18 8bp时， 判定小麦为单体型甲纯合基因型； 当所述第二扩增产物的长度为214bp时， 判定小麦为单体型乙纯合基因型；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114774579 A 2当所述第二扩增产物的长度为188bp和214bp时， 判定小麦为单体型甲和乙杂合基因 型； 单体型甲纯合基因型的抗 旱性优于单体型乙纯合基因型和单体型甲和乙杂合基因型。 9.一种培育抗旱性小麦的方法， 其特征在于， 对小麦的基因型进行鉴定， 筛选单体型甲 纯合基因型的小麦 。 10.根据权利要求9所述方法， 其特 征在于， 所述 鉴定方法包括测序或PCR ‑RFLP。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114774579 A 3