(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210706980.1 (22)申请日 2022.06.21 (66)本国优先权数据 202111354913.X 2021.1 1.16 CN (71)申请人 山东大学齐鲁医院 地址 250012 山东省济南市文化西路107号 (72)发明人 陈丽　侯新国　蒋玲　刘福强　 孙玉静　张晓黎　王川　 (74)专利代理 机构 深圳舍穆专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 44398 专利代理师 邱爽 (51)Int.Cl. C12N 15/55(2006.01) C12N 9/20(2006.01) C12Q 1/6883(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 检测样本中LPL基因突变的试剂在制备筛查 高脂血症患者的试剂盒中的应用 (57)摘要 本公开描述了一种检测样本中LPL基因突变 的试剂在制备筛查高脂血症患者的试剂盒中的 应用， LPL基因突变为LPL  c.986A>C。 本发明还公 开了一种检测样本中LPL氨基酸突变的试剂在制 备筛查高脂血症患者的试剂盒中的应用、 检测样 本中LPL基因突变的试剂在制备筛查急性胰腺炎 患者的试剂盒中的应用、 检测样本中LPL基因突 变的试剂在制备筛查高甘油三酯血症患者的试 剂盒中的应用以及检测样本中LPL基因突变的试 剂在评估高脂血症、 急性胰腺炎或高甘油三酯血 症的易感性的试剂盒中的应用。 根据本发明， 能 够提供新的高脂血症的致病基因位点或高脂血 症高风险的突变位点， 有助于高脂血症的诊断、 治疗与预防。 权利要求书1页 说明书12页 附图6页 CN 115109789 A 2022.09.27 CN 115109789 A 1.一种检测样本中LPL基因突变的试剂在制备筛查高脂血症患者的试剂盒中的应用， 其特征在于， 所述 LPL基因突变为 LPL c.986A>C 。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述试剂盒包括用于扩增LPL基因的引物 对和/或用于检测LPL  c.986A>C的探针。 3.根据权利 要求2所述的应用， 其特征在于， 所述用于检测LPL  c.986A>C的探针根据人 基因组中LPL基因编码区第986位碱基的上 下游的核苷酸序列进行设计得到 。 4.根据权利 要求3所述的应用， 其特征在于， 所述试剂盒还包括dNTP s、 DNA聚合酶和 PCR 反应缓冲液。 5.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述试剂盒包括实时荧光定量检测试剂， 所述实时荧光定量检测试剂包含用于实时荧光定量检测所述LPL基因突变的上游引物和下 游引物， 所述上游引物的序列包括5 ’ ‑GCCGCTACCACCAAGAATATC ‑3’， 所述下游引物的序列包 括5’ ‑TCAGTACATGTGATGCAGTGAGC ‑3’。 6.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述样本来自于被检测者的外周血、 唾液、 组织样本中的至少一种， 且所述 LPL基因突变是指LPL基因的胚系突变。 7.一种检测样本中LPL氨基酸突变的试剂在制备筛查高脂血症患者的试剂盒中的应 用， 其特征在于， 所述 LPL氨基酸 突变为LPL p.Y329S。 8.一种检测样本中LPL基因突变的试剂在制备筛查急性胰腺炎患者的试剂盒中的应 用， 其特征在于， 所述 LPL基因突变为 LPL c.986A>C 。 9.一种检测样本 中LPL基因突变的试剂在制备筛查高甘油三酯血症患 者的试剂 盒中的 应用， 其特 征在于， 所述 LPL基因突变为 LPL c.986A>C 。 10.一种检测样本中LPL基因突变的试剂在评估高脂血症、 急性胰腺炎和/或高甘油三 酯血症的易感性的试剂盒中的应用， 其特 征在于， 所述 LPL基因突变为 LPL c.986A>C 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115109789 A 2检测样本中LPL 基因突变的试剂在制备筛查高脂血症患者的 试剂盒中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 具体涉及一种检测样本中LPL基因突变 的试剂在 制备筛查高脂血症患者的试剂盒中的应用。 背景技术 [0002]随着人们生活水平的不断提高， 日常膳食结构有了很大变化， 导致越来越多的人 出现血液中营养成分含量失衡， 例如血脂水平过高导致的高脂血症(hyperlipidemia； HLP)， 而高脂血症患者患上动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)和急性胰腺炎(AP)方面的 风险都会显著提升。 脂类具体涵盖了类脂以及脂肪， 脂肪指的是三脂肪酸甘油酯， 也就是甘 油三酯(TG)， 如果存在引起甘油三酯分解减少或者是合成增加的因素， 那么就可能出现高 甘油三酯血症(HTG)， 从而导 致高脂血症。 [0003]出现高脂血症的因素有很多， 主要包含了遗传因素、 不健康的生活方式、 2型糖尿 病等。 当前众多的研究发现， 发生突变后可导致严重高甘油三酯血症的基因包括： 载脂蛋白 C‑II(APOC2)、 脂蛋白脂酶(LPL)、 脂酶成熟因子1(LMF 1)、 载脂蛋白V(APOA5)、 糖基磷脂酰肌 醇锚定的高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)等。 其中， 脂蛋白脂酶(LPL)的缺陷是出现高甘 油三酯血症的重要的原因。 人脂蛋白酯酶(LPL)基因主要 是位于染色体8p22上， 是一种酯化 酶， 具有甘油三酯水解酶的活性， 在脂质代谢中发挥极其重要的作用。 有研究表明LPL基因 突变导致脂蛋白脂酶活性降低， 可影响甘油三酯的分解代谢， 导致乳糜微粒代谢 受阻， 体内 堆积的乳糜微粒越来越多， 从而致使高脂血症的出现。 [0004]目前有较多研究对高脂血症的致病机理进行了阐述， 但是仍存在未知致病基因位 点。 进一步研究高脂血症的致病机理， 分离出家族性高脂血症的新致病基因突变， 对于高脂 血症的诊断、 治疗与预防具有重要的意 义。 发明内容 [0005]本公开有鉴于上述现有技术的状况而完成， 其目的在于提供一种高脂血症的致病 基因位点或高脂血症高风险的突变位 点， 有助于高脂血症的诊断、 治疗与预防。 [0006]为此， 本公开第一方面提供了一种检测样本中LPL基因突变的试剂在制备筛查高 脂血症患者的试剂盒中的应用， 所述LPL基因突变为LPL  c.986A>C。 本公开中， 通过家系 研 究鉴定出LPL  c.986A>C突变， 并通过功能研究证实LPL  c.986A>C突变会影响脂蛋白酯酶 (LPL)活性， 由此， 提供了新的高脂血症的致病基因位点或高脂血症高风险的突变位点， 通 过检测样本中的LPL  c.986A>C突变， 能够辅助筛查高脂血症患者。 [0007]在本公开所涉及的应用中， 可选地， 所述试剂盒包括用于扩增LPL基因的引物对 和/或用于检测LPL  c.986A>C的探针。 由此， 能够通过引物对和/或探针对LPL  c.986A>C进 行捕获和/或检测。 [0008]在本公开所涉及的应用中， 可选地， 所述用于检测 LPL c.986A>C的探针根据人基说　明　书 1/12 页 3 CN 115109789 A 3