(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210713445.9 (22)申请日 2022.06.22 (71)申请人 江苏康为世纪生物科技股份有限公 司 地址 225300 江苏省泰州市药城大道一 号 TQB大楼4楼 申请人 江苏健为诊断科技有限公司 (72)发明人 肖欢欢　马竣　庄志华　赵利兰　 王春香　 (74)专利代理 机构 上海助之鑫知识产权代理有 限公司 31328 专利代理师 陈详 (51)Int.Cl. C12Q 1/689(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12Q 1/686(2018.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 用于幽门螺杆菌核酸检测的冻干PCR试剂及 试剂盒 (57)摘要 本发明提供了一种用于幽门螺杆菌核酸检 测的冻干PCR试剂及试剂盒， 具体地， 本发明经过 大量的研究获得了灵敏度极高的检测幽门螺杆 菌核酸的PCR扩增试剂(引物和探针组合)， 进一 步的通过对冻干试剂的研究， 获得了适合该PCR 扩增试剂的冻干体系， 从而制备获得了冻干PCR 试剂， 解决了荧光PCR反应试剂配制过程繁琐， 配 制误差较大， 反应重复性不好， 产品储存及运输 的成本较高的问题。 权利要求书2页 说明书8页 序列表1页 附图2页 CN 115044688 A 2022.09.13 CN 115044688 A 1.一种用于幽门螺杆菌核酸检测的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述冻干PCR试剂包括 上游引物、 下游引物、 第一探针和第二探针； 其中， 所述上游引物序列如SEQ  ID NO.1所示， 所述下游引物序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述第一探针序列如SEQ  ID NO.3所示， 所述第二 探针序列如SEQ  ID NO.4所示。 2.如权利要求1所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述第一探针和所述第二探针的两 端分别标记荧光基团和淬灭基团； 优选地， 所述荧光基团选自下组： FAM、 VIC、 CY5、 和 Texas  Red； 所述淬灭基团选自下组： BHQ1、 BHQ2、 BHQ3、 和TAMRA。 3.如权利要求1所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述冻干PCR试剂还包括冻干保护 剂。 4.如权利要求3所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述冻干保护剂包括选自下组的一 种或多种组分： 海藻糖、 蔗糖、 牛血清蛋白、 棉子糖、 右旋糖酐、 甘油、 DTT、 Pr oclin 300、 甲酰 胺、 和羟丙基 ‑β‑环糊精。 5.如权利要求4所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述冻干保护剂由海藻糖、 棉子糖和 蔗糖组成。 6.如权利要求5所述的冻干PCR试剂， 其特 征在于， 所述冻干保护剂包括： 海藻糖  2‑10重量份， 棉子糖  2‑10重量份， 和 蔗糖    2‑10重量份。 7.如权利 要求1所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述冻干PCR试剂还包括选自下组的 一种或多种组分： Taq  DNA聚合酶、 镁离 子、 氯化钾、 非离 子型去污剂、 和Tris ‑HCL。 8.如权利要求7所述的冻干PCR试剂， 其特征在于， 所述非离子型去污剂包括选自下组 的一种或多种组分： 曲拉通X ‑100、 吐温20、 和NP40 。 9.一种用于幽门螺杆菌核酸检测的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括权利要求1所 述的冻干PCR试剂。 10.一种制备用于幽门螺杆菌核酸检测的冻干PCR试剂的方法， 所述方法包括 步骤： (1)配制液体PCR试剂 所述液体PCR试剂的配比为每25 μl的液体PCR试剂中包括： (2)冻干 将步骤(1)提供的液体PCR试剂冻干， 从而获得 所述冻干PCR试剂；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115044688 A 2其中， 所述上游引物序列如SEQ  ID NO.1所示， 所述下游引物序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述第一探针序列如SEQ  ID NO.3所示， 所述第二探针序列如SEQ  ID NO.4所示。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115044688 A 3