(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210697524.5 (22)申请日 2022.06.20 (71)申请人 中国农业科 学院特产研究所 地址 130112 吉林省长 春市净月经济开发 区聚业大街 4899号 (72)发明人 邢秀梅　卢凯妹　王天骄　董依萌　 (74)专利代理 机构 北京翔石知识产权代理事务 所(普通合伙) 11816 专利代理师 黄素云 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于梅花鹿亲子鉴定和个体识别的分子标 记、 引物及应用 (57)摘要 本发明提供用 于梅花鹿亲子鉴定和个体识 别的分子标记、 引物及应用， 旨在解决现有梅花 鹿亲子鉴定中存在的实际应用的问题。 本发明提 供16个高多态性位点， 包括15个四碱基重复位点 和1个六碱基重复位点， 16个高多态性位点的多 态信息含量在0 .645～0 .892之间， 平均为 0.7428。 当16个位点用于梅花鹿亲子鉴定时， 三 种结合排除概率 分别为； 0.999824、 0.999999、 大 于0.999999， 均大于国际亲子鉴定的通用值 0.9973。 将其中8个位点用于个体识别时， 累计个 体识别率大于99.99％， 累计全同胞识别率大于 99.97％。 本发明克服了现有方法存在的不能精 准鉴定的问题， 用于梅花鹿亲子鉴定及个体识别 精准高效， 具有实际应用价值， 且可以在多个梅 花鹿品种中使用， 极具应用前 景。 权利要求书2页 说明书14页 序列表6页 附图1页 CN 115044683 A 2022.09.13 CN 115044683 A 1.用于梅 花鹿亲子鉴定和个 体识别的S SR标记， 其特 征是， 所述S SR标记位 点信息如下： 2.用于梅花鹿亲子鉴定和个体识别的引物组， 其特征在于， 包括16对引物对， 所述引物 对序列分别如SEQ  ID NO.1‑32所示； 所述引物组用于扩增权利要求1所述S SR标记。 3.如权利要求2所述用于梅花鹿亲子鉴定和个体识别的引物组， 其特征在于， 所述引物 5’端带有荧 光标记。 4.一种梅花鹿亲子鉴定方法， 其特征在于， 利用权利要求2或3所述的引物组中的部分 或全部作为引物， 以梅花鹿基因组DNA作为模板分别进行荧光引物PCR反应， 获得带荧光的 PCR产物， 然后再进行毛细管电泳、 基因分型， 判断样本之间是否为亲子关系。 5.一种梅花鹿个体识别方法， 其特征在于， 利用权利要求2或3所述的引物组中的部分 或全部作为引物， 以梅花鹿基因组DNA作为模板分别进行荧光引物PCR反应， 获得带荧光的 PCR产物， 然后再进行毛细管电泳、 基因分型， 即可判断样本是否来源于同一个 体。 6.一种用于梅花鹿亲子鉴定和/或个体识别的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括权 利要求2或3所述引物组。 7.权利要求6所述试剂 盒的使用方法， 其特征在于， 当待鉴定的两个亲本基因型均已知 的情况下， 可以用5 ‑16对引物进行鉴定； 所述5对引 物为扩增MHL06、 MHL25、 MHL44、 MHL30、权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115044683 A 2MHL58位点的引物； 所述方法， 当待鉴定的两个亲本基因型均已知的情况下， CPE ‑P> 99.99％。 8.权利要求6所述试剂 盒的使用方法， 其特征在于， 当待鉴定的两个亲本其中一方基因 型已知的情况下， 可以用9 ‑16对引物进行鉴定： 所述9对引物为扩增MHL06、 MHL25、 MHL44、 MHL30、 MHL58、 MHL02、 MHL03、 MHL84、 MHL34位点的引物； 所述方法， 当待 鉴定的两个亲本其中 一方基因型已知的情况 下， CPE‑2>99.99％。 9.权利要求6所述试剂盒的使用方法， 其特征在于， 当两个亲本基因型均未知的情况 下， 用全部16对引物进行 亲子鉴定， CPE ‑1>99.98％。 10.权利要求6所述试剂 盒的使用方法， 其特征在于， 当用于梅花鹿个体识别时， 可以采 用5‑8对引物对； 所述5对引物为扩增MHL06、 MHL25、 MHL44、 MHL30和MHL58这5个位点的引物 对； 当采用5对引物对时， PID<0.000001， PID(sib)为0.004446， 可达到梅花鹿个体识别所需 最少位点数； 所述8对引物为扩增MHL02、 MHL03、 MHL06、 MHL25、 MHL30、 MHL44、 MHL58、 MHL8 4这8个位点 的引物对； 当采用8对引物对时， 累计个体识别率大于99.99％， 累计全同胞识别率大于 99.97％。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115044683 A 3