(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210685791.0 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 中华人民共和国大连海关 地址 116007 辽宁省大连市中山长江东路 60号 (72)发明人 杨爱馥　万超　郑秋月　梁冰　 姜丽　刘雪华　 (74)专利代理 机构 北京博识智 信专利代理事务 所(普通合伙) 16067 专利代理师 翁梅玲 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于菰米成分实时荧光PCR检测的成套试剂 及检测方法 (57)摘要 本发明公开了用于菰米成分实时荧光PCR检 测的成套试剂及检测方法， 所述成套试剂包括引 物对及探针， 所述引物对的上游引物为： 5 ’ ‑ CGAGAGTCGTGTGGATGTTGT ‑3’， 所述引物对的下游 引物为： 5 ’ ‑TGCGGAAGGATCATTGTCGT ‑3’， 所述探 针为： 5’ ‑CGGCGGTCGGTAAGAGGTGTTCC ‑3’， 其中在 探针的3’端连接有一个荧光淬灭基团TAMRA， 在 探针的5’端连接有一个荧光报告基团FAM； 所述 成套试剂用于检测待测样品中是否含有菰米成 分； 本发明所述成套试剂用于菰米成分的检测， 具有特异性强、 灵敏度高的优点， 同时具有较好 的重复性与稳定性。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 114990255 A 2022.09.02 CN 114990255 A 1.用于菰米成分实时荧光PCR检测的成套试剂， 其特征在于， 所述成套试剂包括引物对 及探针， 所述引物对的上游引物为： 5 ’ ‑CGAGAGTCGTGTGGATGTTGT ‑3’， 所述引物对的下游引 物为： 5’ ‑TGCGGAAGGATCATTGTCGT ‑3’， 所述探针为： 5 ’ ‑CGGCGGTCGGTAAGAGGTGTTCC ‑3’， 其中 在探针的3 ’端连接有一个荧光淬灭基团TAMRA， 在探针的5 ’端连接有一个荧光报告基团 FAM。 2.根据权利要求1所述的用于菰米成分实时荧光PCR检测的成套试剂， 其特征在于， 所 述成套试剂用于检测待测样品中是否含有菰米成分。 3.一种用于菰米成分实时荧光PCR检测的检测方法， 其特征在于： 所述检测方法以待测 样品的基因组DNA 为模板， 采用权利要求1所述成套 试剂进行实时荧光P CR并检测荧光信号， 如结果显示阳性扩增曲线， 则待测样品含有或疑似含有菰米成分； 如结果不显示阳性扩增 曲线， 则待测样品不含有或疑似不含有菰米成分。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114990255 A 2用于菰米成分实时荧光PCR检测的成套试剂及检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 具体是指用于菰米成分实时荧光PCR检测的成套试剂 及检测方法。 背景技术 [0002]随着现代食品营养学的发展， 公众对营养问题关注的焦 点已经由解决一般人群传 统的营养缺 乏转向如何合理膳食、 平衡营养、 促进健康。 随着国民生活水平的不断提高， 以 及民众保健养生意识的增强， 高营养、 高价值农产品迎合了现阶段国民食物需求营养化、 健 康化的特点， 消费量快速增长； [0003]菰米(Wild  rice)， 也被称作野米， 是禾本科菰属(Zinania  Linnaeus)植物 的颖 果， 属于全谷物， 具有极高的营养价值， 富含蛋白质、 必需氨基酸、 脂肪酸、 维生素、 膳食纤维 以及各种微量元素， 且脂肪含量低。 此外， 菰米还含有大量的活性物质， 如酚酸、 植物甾醇、 γ‑谷维素、 γ ‑氨基丁酸、 类黄酮等， 保证了其作为功能性食品的发展。 菰米种的活性物质 能够有效地抑制高脂血症和氧化应激， 预防肥胖和肝脏脂肪毒性， 改善异常糖代谢和抑制 胰岛素抵抗、 预防动脉粥样硬化、 还具有抗氧化、 抗炎、 抗过敏和免疫调节作用， 因此， 菰米 已得到了国内外的广泛认可， 成为 一种高价 值的保健食品， 被称为 “谷物中的鱼子 酱”； [0004]世界上菰属 植物有4种， 包括分布在东亚的中国菰(Z.latifolia)， 以及分布在北 美的水生菰(Z.aquatica)、 沼 生菰(Z.palustris)、 德克萨斯菰(Z.texana)。 随着菰米的商 业化程度日益提高， 北美 菰米已作为一种营养价值高、 风味独特、 价格昂贵的健康食品进入 饮食业并大量出口到法国、 德国和意大利等国家， 我国也批准了加拿大菰米的准入， 这种进 口的“营养之王 ”， 正在占据国人的餐桌； [0005]但是目前尚无菰米成分检测标准和检测方法， 市场上销售的菰米制品鱼龙混杂、 真假难辨， 因此急 需开发快速、 灵敏、 精准的菰米成分真伪鉴别方法， 以保护消费者的权益， 并为菰米及其制品的进口监管提供技 术支撑。 发明内容 [0006]本发明要解决的技术问题是克服上述技术的缺陷， 提供用于菰米成分实时荧光 PCR检测的成套试剂及检测方法。 [0007]为解决上述技术问题， 本发明提供的技术方案为用于菰米成分实时荧光PCR检测 的成套试剂， 所述成套试剂包括引物对及探针， 所述引物对的上游引物为： 5 ’‑ CGAGAGTCGTGTGGATGTTGT ‑3’， 所述引物对的下游引物为： 5 ’ ‑TGCGGAAGGATCATTGTCGT ‑3’， 所 述探针为： 5 ’ ‑CGGCGGTCGGTAAGAGGTGTTCC ‑3’， 其中在探针的3 ’端连接有一个荧光淬灭基团 TAMRA， 在探针的5 ’端连接有一个荧 光报告基团FAM 。 [0008]进一步地， 所述成套试剂用于检测待测样品中是否含有菰米成分。 [0009]本发明还提供一种用于菰米成分实时荧光PCR检测的检测方法， 所述检测方法以 待测样品的基因组DNA为模板， 采用所述成套试剂进行实时荧光PCR并检测荧光信号， 如结说　明　书 1/4 页 3 CN 114990255 A 3