(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210640954.3 (22)申请日 2022.06.07 (71)申请人 杭州医学院 地址 310053 浙江省杭州市滨江高教园区 滨文路481号 申请人 北京市科 学技术研究院城市安全与 环境科学研究所 (72)发明人 余珉　周兴藩　鞠莉　朱丽瑾　 常宇清　谢昊涵　 (74)专利代理 机构 杭州合信专利代理事务所 (普通合伙) 33337 专利代理师 黄平英 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 端粒长度作为职业性农药接触人群游离三 碘甲状腺原 氨酸改变生物标志 物的用途 (57)摘要 本申请公开一种端粒长度作为职业性农药 接触人群游离三碘甲状腺原氨酸改变生物标志 物的用途， 扩增端粒基因的引物包括： 上游引物 序列如SEQ  IDNO： 1所示， 下游引物序列如SEQ  ID  NO： 2所示； 扩增内参基因的引物包括： 上游引物 序列如SEQ  ID NO： 3所示， 下游引物序列如SEQ   ID NO： 4所示。 本申请经研究发现， 端粒长度可作 为生物标志物用于职业性农药接触人群游离三 碘甲状腺原氨酸异常的易 感性分析， 端粒长度缩 短的职业性农药接触人群更容易游离三碘甲状 腺原氨酸异常。 有望在职业性农药接触人群甲状 腺功能紊 乱监测方面 提供实践参考指标。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图4页 CN 114891879 A 2022.08.12 CN 114891879 A 1.扩增端粒基因和内参基因的引物组合在制备职业性农药接触人群游离三碘甲状腺 原氨酸改变易感性分析检测产品中的用途。 2.根据权利要求1所述的用途， 其特 征在于， 扩增端粒基因的引物包括： 上游引物序列(5' →3') CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT； 下游引物序列(5' →3') GGCTTGCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCT。 3.根据权利要求1所述的用途， 其特 征在于， 扩增内参基因的引物包括： 上游引物序列(5' →3') CAGCAAGTGGGAAGGTGTAATCC； 下游引物序列(5' →3') CCCATTCTATCATCA ACGGGTACAA。 4.根据权利要求1所述的用途， 其特征在于， 扩增内参基因的引物以RPLP0基因序列为 目标基因进行设计得到； 扩增端 粒基因的引物以 “TTAGGG”为单位的重复序列为目标序列进 行设计得到 。 5.根据权利要求1所述的用途， 其特征在于， 所述易感性分析检测产品为试剂或试剂 盒。 6.一种职业性农药接触人群游离三碘甲状腺原氨酸改变的易感性分析检测试剂或试 剂盒， 其特 征在于， 包括扩增端粒基因和内参基因的引物； 扩增端粒基因的引物包括： 上游引物序列(5' →3') CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT， 下游引物序列(5' →3') GGCTTGCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCT； 扩增内参基因的引物包括： 上游引物序列(5' →3') CAGCAAGTGGGAAGGTGTAATCC， 下游引物序列(5' →3') CCCATTCTATCATCA ACGGGTACAA。 7.端粒长度作为生物标志物在制备职业性农药接触人群游离三碘甲状腺原氨酸改变 易感性分析检测产品中的用途。 8.根据权利要求7 所述的用途， 其特 征在于， 所述端粒长度的计算公式为： 端粒相对长度(T/S)＝2^(‑ΔCt)， 其中ΔCt＝Ct端 粒‑Ct内参； Ct端 粒指扩增受试者端粒基因并达 到设定荧 光信号阈值时的最终Ct值； Ct内参指扩增受试者内参基因并达 到设定荧 光信号阈值时的最终Ct值。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114891879 A 2端粒长度作 为职业性农药接触人群游离三碘甲状腺原氨酸改 变生物标志物的用途 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医药技术领域， 具体涉及 一种端粒长度变化作为职业性农药接触 人群游离三 碘甲状腺原 氨酸改变的生物标志 物用途。 背景技术 [0002]端粒是真核生物染色D NA末端的特殊结构， 早在20世纪80年代中期， 科学家们就发 现了端粒酶， 当细胞DNA复制终止时， 在端粒酶的帮助下DNA就能够通过端粒依赖模版的复 制， 补偿由去除引物引起的末端缩短， 因此在端粒的保持过程中， 端粒酶至关重要； 但随着 细胞分裂次数的增加， 端 粒的长度逐渐缩短， 当端 粒变得不能再短时， 细胞就不再分裂而会 死亡。 近年来， 科学家们通过 大量研究发现， 端粒的长度或许和很多疾病的发病直接相关。 [0003]全球每年农药使用总量达30亿千克， 每公顷农植物耕地面积的农药使用量为2.38 ～32.22千 克。 其中， 中 国每公顷农业用地面积的农药使用量约10.93千克， 位居全球第5位。 亚洲发展中国家的农业从业者总数达2500万， 63.79％的农业从业者仍超量使用农药， 48.2％的农业从业 者不规范使用农药， 面临着农药 所致健康危害风险。 [0004]农药不仅造成中毒事件， 还可产生多种不良健康效应， 干扰机体正常的生理功能， 诱发甲状腺生理异常和(或)病理表现。 农药具有影响农业从业者甲状腺激素水平的作用。 农药使用与接触是造成农业从业者外周血中游离三碘甲状腺原氨酸水平升高的潜在职业 危害因素， 而游离三 碘甲状腺原 氨酸被视作农药中毒患者病情及其愈后的监测评估指标。 发明内容 [0005]本申请提供一种端粒长度变化作为生物标志物在职业性农药接触人群游离三碘 甲状腺原 氨酸改变易感性分析中的用途。 [0006]具体地， 提供一种扩增端粒基 因和内参基因的引物在制备职业性农药接触人群游 离三碘甲状腺原 氨酸改变易感性分析检测产品中的用途。 [0007]可选的， 扩增端粒的引物包括： [0008]上游引物序列(5' →3') [0009]CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT(SEQ ID NO： 1)； [0010]下游引物序列(5' →3') [0011]GGCTTGCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCT(SEQ ID NO： 2)。 [0012]可选的， 扩增内参基因的引物包括： [0013]上游引物序列(5' →3') [0014]CAGCAAGTGGGAAGGTGTAATCC(SEQ ID NO： 3)； [0015]下游引物序列(5' →3') [0016]CCCATTCTATCATCA ACGGGTACAA(SEQ ID NO： 4)。 [0017]可选的， 所述内参基因为RPLP0(ribosomal  protein lateral stalk subunit 说　明　书 1/6 页 3 CN 114891879 A 3