(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211140390.3 (22)申请日 2022.09.20 (71)申请人 中国农业科 学院北京畜牧兽医研究 所 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 康俊梅　王珍　杨习江　蒋学乾　 李明娜　龙瑞才　杨青川　 (74)专利代理 机构 北京惠智天 成知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 11681 专利代理师 周建 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C40B 40/06(2006.01) (54)发明名称 紫花苜蓿叶面积相关的SNP分子标记组合及 应用 (57)摘要 本申请提供了紫花苜蓿叶面积相关的SNP分 子标记组合及其应用， 本申请提供的SNP分子标 记包括表1中所示的SNP位点组合或表2所示的 SNP位点组合。 利用本申请提供的SNP分子标记能 够实现从基因水平筛选叶面积性状相关的苜蓿 优异种质材料， 从而提高高产优质苜蓿新品种的 选育效率， 加速 育种进程。 权利要求书1页 说明书17页 附图6页 CN 115216559 A 2022.10.21 CN 115216559 A 1.与紫花苜蓿叶面积相 关的SNP分子标记组合， 所述SNP分子标记组合由表1所示的16 个SNP为位点组成或表2所示的61个SNP位 点组成。 2.分析紫花苜蓿叶面积性状的方法， 将待测苜蓿的基因组DNA的SNP位点基因型与对照 苜蓿的基因 组DNA的所述的位 点基因型进行比较； 其中， 所述SNP位点为表1所示的16个SNP为位点组成或表2所示的61个SNP位点形成的 组合。 3.分析紫花苜蓿叶面积性状的分子探针组合， 其检测权利要求1所述的SNP分子标记 组 合。 4.分析紫花苜蓿叶面积的基因芯片， 其具有权利要求1所述的SNP分子标记 组合或负载 有权利要求3所述的SNP分子 探针标记组合； 其中， 权利要求1所述的SNP分子标记组合由表1所示的16个SNP为位点组成或表2所示 的61个SNP位 点组成。 5.分析紫花苜蓿叶面积的试剂盒， 其具有权利要求1所述的SNP分子标记 组合或权利要 求3所述的SNP分子 探针标记组合或权利要求 4所述的基因芯片； 其中， 权利要求1所述的SNP分子标记组合由表1所示的16个SNP位点组成或表2所示的 61个SNP位 点组成。 6.分析紫花苜蓿叶面积的方法， 应用权利要求1所述的SNP分子标记组合或权利要求3 所述的SNP分子探针标记组合或权利要求4所述的基因芯片或权利要求5所述的试剂盒待测 样品进行检测。 7.权利要求1所述的SNP分子标记组合或权利要求3所述的分子探针组合或权利要求4 所述的基因芯片或权利要求5所述的试剂盒在检测紫花苜蓿叶面积 中的用途， 其具有如下 任一所述的用途： （1） 在苜蓿叶面积性状评价中的应用； （2） 在苜蓿叶面积性状相关品种鉴定中的应用； （3） 在苜蓿叶面积性状相关品种 种质资源保护中的应用； （4） 在苜蓿叶面积性状相关品种 种质资源改良中的应用； （5） 在苜蓿叶面积性状相关品种筛 选的应用； （6） 在苜蓿叶面积性状相关品种育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115216559 A 2紫花苜蓿叶面积相关的SNP分子标记组合及应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 具体涉及紫花苜蓿叶面积相关的SNP分子标记的开发 及其应用。 背景技术 [0002]苜蓿作为以收获茎叶营养体为主的牧草， 叶片对苜蓿产草量的贡献率达30%~60%。 同时叶中蛋白含量远高于茎， 而且对饲草品质有重要的影响。 因此， 研究苜蓿叶面积大小对 提高苜蓿产量和品质方面有一定的潜力， 对促进高产、 优质苜蓿生产有重要意义， 选育叶面 积大， 叶量丰富、 叶茎比高的苜蓿新品种一 直是育种工作者追求的目标。 [0003]随着基因工程的发展， 越来越多的科研工作者开始探索与叶片相关的基因， 从而 获得叶面积性状较为突出 的苜蓿品种， 以取代传统的通过采集叶片、 观察评价叶片大小等 形态指标来进行品种筛 选或选育。 [0004]目前， CN107384939B公开了一种 MtUNUSUAL  FLORAL ORGANS基因在调控小叶数量 和叶茎比中的应用， 其 目的是通过基因工程改造直接提高苜蓿小叶片数量， 从而获得高产 优质苜蓿新品系， 然而紫花苜蓿是同源四倍体 （2n=4x=32） ， 异 花授粉植物， 具有高杂合度和 自交不亲和性， 其遗传背景复杂， 通过一种基因难以对大量苜蓿群体单株进行与叶面积相 关的品质性状的筛选。 因此， 从单个基因的角度筛选与叶面积性状相关的苜蓿优良品种仍 面临较大的挑战。 发明内容 [0005]为了实现 高效、 快速、 精准的筛选叶面积性状相关的苜蓿优异种质材料， 从而提高 高产优质苜蓿新品种的选育效率， 加速育种进程。 本申请以叶片大小上有显著差异的紫花 苜蓿为亲本材料， 通过杂交获得F1代群体， ， 对亲本及其F1后代的叶面积进 行多年的表型鉴 定分析， 采用基因组重测序技术完成了亲本及F1代群体的基因型分析， 通过QTL定位， 获得 了16~61个SNP组合， 为利用分子标记辅助选择培育叶片大、 产量高且品质优良的苜蓿新品 种奠定基础。 [0006]为实现本发明的技术目的， 本发明第一方面提供一种与紫花苜蓿叶面积相关的 SNP分子标记组合， 所述SNP分子标记组合由表1所示的16个SNP组成： 表1说　明　书 1/17 页 3 CN 115216559 A 3