(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210990251.3 (22)申请日 2022.08.18 (71)申请人 汕头大学医学院 地址 515041 广东省汕头市新陵路2 2号 (72)发明人 苏敏　陈佳敏　刘茜　张智华　 (74)专利代理 机构 广州三环 专利商标代理有限 公司 44202 专利代理师 彭妙玲 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检 测试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种食管鳞癌及早期癌变外周 血游离DNA标记检测试剂盒， 包括用于检测靶向 基因CNV区域的探针和引物对， 以及用于检测内 参基因RPP30、 H FE2的探针和引物对； 所述靶向基 因包括EGFR、 MYC、 CCND1、 SOX2和PIK3CA基因 中的 一种或者多种。 本发明的试剂盒可用于检测组 织， 从基因检测的领域用来诊断及辅助诊断食管 鳞癌及早期 食管鳞癌； 也可用于通过检测人外周 血进行人群食 管鳞癌早期筛查， 抽取外周血相比 于通过内镜取活检组织等方法简单易行， 减少待 测者的痛苦； 有利于辅助诊断并帮助实现食管鳞 癌高危人群的早筛早诊。 权利要求书2页 说明书9页 附图13页 CN 115369167 A 2022.11.22 CN 115369167 A 1.一种食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂 盒， 其特征在于， 包括用于检 测靶向基因CNV区域的探针和引物对， 以及用于检测内参基因RPP30、 HFE2的探针和引物对； 所述靶向基因为EGFR、 M YC、 CCND1、 SOX2和PIK3 CA基因中的一种或者多种。 2.根据权利要求1所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 所述靶向基因为CCND1 ‑SOX2或CCND1 ‑SOX2‑MYC‑EGFR或CCND1 ‑PIK3CA‑MYC‑EGFR或 CCND1‑SOX2‑PIK3CA‑MYC‑EGFR。 3.根据权利要求2所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 所述靶向基因为CCND 1‑SOX2‑PIK3CA‑MYC‑EGFR时包括三个反应体系， 其中， 反应体系1 包括EGFR、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系2包括MYC、 CCND1、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系3包括 SOX2、 PIK3 CA、 RPP30、 HFE2基因。 4.根据权利要求3所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 所述靶向基因和内参基因的探针和引物对的序列如下 所示： 权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115369167 A 2其中， 所述探针的5 ’端结合荧光基团为FAM、 HEX、 ROX或CY5， 所述探针的3 ’端结合荧光 淬灭基团为BHQ1或BHQ2。 5.根据权利要求2所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 所述靶向基因为CCND1 ‑SOX2‑MYC‑EGFR时包括三个反应体系， 其中， 反应体系1包括 EGFR、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系2包括MYC、 CCND1、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系3包括S OX2、 RPP30、 HFE2基因。 6.根据权利要求2所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 所述靶向基因为CCND1 ‑PIK3CA‑MYC‑EGFR时包括三个反应体系， 其中， 反应体系1包括 EGFR、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系2包括MYC、 CCND1、 RPP30、 HFE2基因； 反应体系3包括 PIK3CA、 RPP30、 HFE2基因。 7.根据权利要求1所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒， 其特征在 于， 可用于组织和人外周血。 8.根据权利要求1 ‑7任一项所述食管鳞癌及早期癌变外周血游离DNA标记检测试剂盒 在制备诊断食管癌的产品中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115369167 A 3