ICS 65.020.01 B 05 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 1402—2011 白梨花粉 Pollen of pyrus bretschncideri 2011 - 05 -10 发布 河北省质量技术监督局 2011 - 05 - 20 实施 发 布 DB13/T 1402—2011 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由河北农业大学提出。 本标准起草单位：河北农业大学。 本标准主要起草人：乔进春，许建辉，朱梅玲，朱玲欣，许建锋，张江红，张殿生，王君。 1 DB13/T 1402—2011 白梨花粉 1 范围 本标准规定了白梨花粉的适采品种、制取方法、贮存、包装、运输、复原、检验及等级划分。 本标准适用于白梨花粉的制取和应用。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 白梨 pyrus bretschncideri 中国原产，主要分布在华北。蔷薇科梨属植物。乔木。花序有花 6～10 朵；花白色，雄蕊 20，花 药浅紫红色；果实卵形或近球形，果皮黄绿色，皮孔细密，萼片脱落。果倒卵形至长圆形，果皮黄色， 子房 4～5 室。 2.2 大蕾期 单花的花瓣膨大露出花萼至花瓣绽开前。 2.3 初花期 树上5%～10%的花开放。 2.4 花药 长在花丝顶端的囊状体。 2.5 花粉 花药里的粉粒。 2.6 粗花粉 花药开裂散出花粉现成的花药壳与花粉的混合物。 2.7 精花粉 将粗花粉中花药壳等杂质后获得的纯净花粉。 2.8 花粉发芽率 花粉在适宜的条件下培育一定的时间，长出花粉管（亦称花粉发芽）的花粉粒数占培育花粉粒数的 比值，以百分率表示。用于指示该批花粉的生活力。 2 DB13/T 1402—2011 3 适采品种 本种品种较多，栽培较为广泛的有鸭梨、雪花梨、酥梨、茌梨、蜜梨、秋白梨等品种均适宜采集。 河北省适宜采集花粉的品种是本地区广泛栽培的鸭梨和雪花梨。 4 花朵采集 4.1 采集时期 花朵大蕾期开始采集，直至初花期，采集大蕾期至当天上午开放的花朵。 4.2 花朵采集 花朵采集时，间隔 20 cm 左右留一花序，每花序留基部 2 朵花，采下的花朵收集起来，放入干净 容器。 收集的花朵应及时脱出花药，如来不及脱出，临时存放在阴凉处，不得过厚堆压或暴晒，并每间隔 1 小时翻动一次。 5 花药脱出与精选 5.1 脱出花药 将收集到的花朵用电动碎花机打碎，使花药与花萼、花瓣分离。同时联动孔距 5 mm 的粗筛，分 离出花柄、花托、花瓣等，收集脱出花药。 5.2 筛分精选 将脱出的雄蕊、花药放入孔距 2.2 mm 圆筒筛中分离杂质。 将筛出的花药经过孔距 1.25 mm 的细筛，筛出花丝，剩余基本纯净的花药。 6 6.1 粗花粉制取 除湿 将精选出的纯净花药均匀摊放在干燥室内的凉架牛皮纸上，厚度不超过 1 cm，间隔 1 小时用小耙 子翻动一次，共翻动 3～4 次。 6.2 干燥 花药经除湿可转入干燥室处理，保持干燥室内温度24～26℃，排风扇不间断排风，间隔1～1.5小时 用小耙子耙划一次，经36～48小时干燥，花药完全爆开散粉。 7 精花粉的制取 粗花粉内包含花药壳和极少量的其他杂质，为了方便贮存和长途运输，将杂质分离，获取精花粉。 将粗花粉平摊在牛皮纸上，上覆80目细筛，用吸尘器在筛上面来回滑动，把筛网下面的花粉吸净，收集 吸尘器内的花粉，即得到精花粉。 3 DB13/T 1402—2011 8 花粉的贮存、包装、运输与复原 8.1 粗花粉的贮存、包装和运输装 8.1.1 贮存 粗花粉制取后置于通气性好的纸质容器内，暂存放于阴凉、通风、干燥的室内，可存放7～10天。 过久存放会降低花粉的生活力。 8.1.2 包装和运输 运输前，用纸袋包装，每袋装500 g，订书机单钉封口，放入塑膜自封袋，再加入50 g变色硅胶（干 燥剂），封口，装入纸箱。 粗花粉可进行常温运输，7天内送达。 8.2 精花粉的包装、贮存、运输和复原 8.2.1 包装 精花粉包装前再用吸尘器再吸滤一次，用纸袋包装，每包100 g，订书机单钉封口，每5包装入一个 塑膜自封袋内，加入250 g变色硅胶（干燥剂），封口。 8.2.2 贮存 放入冰柜或冰箱冷冻室贮藏，冷藏温度-21℃～-27℃，可存放至翌年授粉用。 8.2.3 运输 必须在低温下进行，在外包装内加入干冰块，用泡沫箱或小型保温箱运输。 8.2.4 复原 将冷藏的精花粉从冷藏环境中取出，打开密封口，取出干燥剂，将纸质包装置于阴凉通风的常温室 内放置 24，即可恢复正常生活力。 9 花粉检验与等级划分 9.1 形态检验 以主要白梨品种花粉为标样，在 100×10 倍显微镜下观察，如检验样品的形态、大小、色泽与标样 一致，可判定为白梨花粉。 9.2 花粉发芽率检测 9.2.1 材料与仪器 琼脂 1 g，蔗糖 11 g，蒸馏水 100 ml；显微镜，培养皿，载玻片，500 ml 烧杯，50 ml 三角瓶， 100 ml 量杯，玻璃棒，小药勺，加热炉，恒温箱，吸水纸，棉球棒，电子天平，牙签。 9.2.2 花粉吸湿处理 4 DB13/T 1402—2011 将充分吸水的吸水纸 3～4 层放于烧杯底部，取待测花粉少许放入 50 ml 三角瓶（开口） ，然后放进 烧杯中，用纸板盖上烧杯，使花粉吸湿 24～36 小时。 9.2.3 培养基的制备 将称好的 1 g 琼脂和 100 ml 蒸馏水倒入烧杯杯中，放到加热炉上边搅动边加热至沸腾成透明状液 体，停止加热，倒入 11 g 蔗糖，继续搅拌，至蔗糖完全溶解。 9.2.4 载玻片的制备 培养皿底部铺上两层吸水纸，吸足水，放上两根小木棍（或干净牙签） 。 用玻璃棒蘸取培养基液适量，涂布到载玻片上，以2 mm厚为宜，放置在培养皿的小木棍上，盖好 盖子备用。 9.2.5 花粉播撒 用棉棒沾取待检花粉适量，在涂好培养基的载玻片上方，用手指轻轻弹动，使花粉颗粒均匀地散布 到培养基表面，盖上培养皿盖。 9.2.6 恒温培养 将播好花粉的培养皿放入27℃的恒温箱中培养3小时。 9.2.7 镜鉴 取出载玻片放在100倍的显微镜下观察花粉的发芽情况，在每个培养基的中心区域选3个点观察，分 别记录每个观察点的发芽花粉数和花粉总数。 9.2.8 发芽率的计算 花粉发芽率=发芽的花粉粒数/（发芽的花粉粒数+没发芽的花粉粒数）×100% 。 9.3 等级划分 按照花粉发芽率的高低划分白梨花粉等级。见表 1。 表1 花粉等级 等级 发芽率（%） 一级 ≥80 二级 65～79.9 三级 50～64.9 合格 30～49.9 不合格 ＜30 花粉发芽率低于 30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。 5