书 书 书犐犆犛 ６５ ． １００ 犅 １７ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 １５６７０ ． ４ — ２０１７ /G21 /G22 /G23 /G24 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ — １９９５ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C ４ /G2D /G2E ： /G2F /G30 /G31 /G32 /G25 /G30 /G28 /G29 /G33 /G34 /G35 /G36 /G2B 犜狅狓犻犮狅犾狅犵犻犮犪犾狋犲狊狋犿犲狋犺狅犱狊犳狅狉狆犲狊狋犻犮犻犱犲狊狉犲犵犻狊狋狉犪狋犻狅狀 — 犘犪狉狋 ４ ： 犃犮狌狋犲狅狉犪犾狋狅狓犻犮犻狋狔狋犲狊狋 — 犕犻犾犾犲狉犪狀犱犜犪狀犻狀狋犲狉 ’ 狊犿犲狋犺狅犱 ２０１７  ０７  １２ /G37 /G38 ２０１８  ０２  ０１ /G39 /G3A /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G37 /G38书 书 书前 　　 言 　　 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ 《 农药登记毒理学试验方法 》 分为以下部分 ： ——— 第 １ 部分 ： 总则 ； ——— 第 ２ 部分 ： 急性经口毒性试验 　 霍恩氏法 ； ——— 第 ３ 部分 ： 急性经口毒性试验 　 序贯法 ； ——— 第 ４ 部分 ： 急性经口毒性试验 　 概率单位法 ； ——— 第 ５ 部分 ： 急性经皮毒性试验 ； ——— 第 ６ 部分 ： 急性吸入毒性试验 ； ——— 第 ７ 部分 ： 皮肤刺激性 ／ 腐蚀性试验 ； ——— 第 ８ 部分 ： 急性眼刺激性 ／ 腐蚀性试验 ； ——— 第 ９ 部分 ： 皮肤变态反应 （ 致敏 ） 试验 ； ——— 第 １０ 部分 ： 短期重复经口染毒 （ ２８ 天 ） 毒性试验 ； ——— 第 １１ 部分 ： 短期重复经皮染毒 （ ２８ 天 ） 毒性试验 ； ——— 第 １２ 部分 ： 短期重复吸入染毒 （ ２８ 天 ） 毒性试验 ； ——— 第 １３ 部分 ： 亚慢性毒性试验 ； ——— 第 １４ 部分 ： 细菌回复突变试验 ； ——— 第 １５ 部分 ： 体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验 ； ——— 第 １６ 部分 ： 体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 ； ——— 第 １７ 部分 ： 哺乳动物精原细胞 ／ 精母细胞染色体畸变试验 ； ——— 第 １８ 部分 ： 啮齿类动物显性致死试验 ； ——— 第 １９ 部分 ： 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验 ； ——— 第 ２０ 部分 ： 体外哺乳动物细胞基因突变试验 ； ——— 第 ２１ 部分 ： 体内哺乳动物肝细胞程序外 ＤＮＡ 合成 （ ＵＤＳ ） 试验 ； ——— 第 ２２ 部分 ： 体外哺乳动物细胞 ＤＮＡ 损害与修复 ／ 程序外 ＤＮＡ 合成试验 ； ——— 第 ２３ 部分 ： 致畸试验 ； ——— 第 ２４ 部分 ： 两代繁殖毒性试验 ； ——— 第 ２５ 部分 ： 急性迟发性神经毒性试验 ； ——— 第 ２６ 部分 ： 慢性毒性试验 ； ——— 第 ２７ 部分 ： 致癌试验 ； ——— 第 ２８ 部分 ： 慢性毒性与致癌合并试验 ； ——— 第 ２９ 部分 ： 代谢和毒物动力学试验 。 本部分为 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ 的第 ４ 部分 。 本部分按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本部分部分代替 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ — １９９５ 《 农药登记毒理学试验方法 》。 本部分与 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ — １９９５ 的急性经口毒性试验部分相比主要变化 ： ——— 修改和调整了总体结构和编排格式 ； ——— 增加了一些条款 （ 见第 １ 章 、 第 ２ 章 、 第 ３ 章 、 第 ５ 章 、 ６．４ 、 第 ８ 章 ）； ——— 增加了附录 Ａ “ 反应率  概率单位表 ” 和附录 Ｂ “ 反应率 ０％ 及 １００％ 的概率单位的近似值 ”。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 １５６７０ ． ４ — ２０１７ 本部分起草单位 ： 农业部农药检定所 。 本部分主要起草人 ： 贺锡雯 、 张丽英 、 曲甍甍 、 陶传江 。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为 ： ——— ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ — １９９５ 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 １５６７０ ． ４ — ２０１７ 农药登记毒理学试验方法第 ４ 部分 ： 急性经口毒性试验概率单位法 １ 　 范围 ＧＢ ／ Ｔ１５６７０ 的本部分规定了急性经口毒性试验 　 概率单位法的基本原则 、 方法和要求 。 本部分适用于为农药登记而进行的急性经口毒性试验 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文 件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ１４９２５ 　 实验动物 　 环境及设施 农药登记资料规定 （ 中华人民共和国农业部令 〔 ２００７ 〕 第 １０ 号 ） ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 急性经口毒性 　 犪犮狌狋犲狅狉犪犾狋狅狓犻犮犻狋狔 一次或在 ２４ｈ 内多次经口给予实验动物受试物后 ， 动物在短期内出现的健康损害效应 。 ３ ． ２ 剂量 　 犱狅狊犲 所给受试物的量 ， 以实验动物单位体重所接受受试物的质量表示 （ ｍｇ ／ ｋｇ 体重 ）。 ３ ． ３ 半数致死剂量 　 犿犲犱犻犪狀犾犲狋犺犪犾犱狅狊犲 ＬＤ ５０ 一次或在 ２４ｈ 内多次给予实验动物受试物后 ， 引起实验动物总体中半数死亡的毒物统计学剂量 。 以实验动物单位体重接受受试物的质量表示 （ ｍｇ ／ ｋｇ 体重 ）。 ３ ． ４ 剂量  反应关系 　 犱狅狊犲狉犲狊狆狅狀狊犲狉犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻狆 剂量与特定效应的发生率间的关系 。 ４ 　 试验目的 急性经口毒性试验是评估农药毒性的第一步 ， 通过短时间经口染毒初步了解受试物的毒性特征和 剂量  反应关系 ， 为急性毒性分级 、 标签管理和其他毒理学试验剂量选择提供依据 。 １ 犌犅 ／ 犜 １５６７０ ． ４ — ２０１７ ５ 　 试验概述 概率单位法 （ ＭｉｌｌｅｒａｎｄＴａｎｉｎｔｅｒ ’ ｓｍｅｔｈｏｄ ） 亦称目测法或对数概率单位绘图法 。 以灌饲法经口给各试验组动物不同剂量的受试物 。 染毒剂量的选择可通过预试验确定 。 染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况 。 试验期间死亡动物要进行尸检 ， 试验结束时仍存活的动物应人道处死并进行大体解剖 。 ６ 　 试验方法 ６ ． １ 　 受试物 受试物可配制成水溶液 、 油溶液或悬浮液 。 尽可能选用水或食用油 （ 如玉米油 ） 作溶剂 ， 其他如羧甲基纤维素钠 、 明胶和淀粉可将受试物配制成混悬液或糊剂 。 除水以外的溶剂 ， 用前应了解其毒理学特性 ， 必要时设立溶剂对照组 。 不同浓度受试物现用现配 。 一次染毒容量不超过 １ｍＬ ／ １００ｇ 体重 ， 水溶液可达到 ２ｍＬ ／ １００ｇ 体重 。 通过调整受试物溶液的浓度 ， 使各剂量组经口染毒的容量一致 。 如果一次染毒容量太大 ， 也可在 ２４ｈ 内分 ２ 次 ～ ３ 次给予 。 ６ ． ２ 　 实验动物 ６ ． ２ ． １ 　 种属和性别 啮齿类动物中可选用 ＳＤ 大鼠或 Ｗｉｓｔａｒ 大鼠 。 两种性别 ， 雌性动物应是未妊娠和未经产的 。 ６ ． ２ ． ２ 　 年龄和体重 健康成年大鼠鼠龄在 ８ 周 ～ １０ 周内 ， 体重变异不超过同性别动物平均体重的 ±２０％ 。 按随机原则进行分组 。 ６ ． ３ 　 分组和剂量水平 要有足够不同剂量的试验组 ， 至少 ３ 个剂量 （ 通常设 ４ 个 ～ ５ 个剂量 ）， 每组动物 １０ 只 ， 雌雄各半 。 各剂量的组间距应使各试验组产生不同程度的毒性反应和死亡率 ， 一般以 ０．６５ ～ ０．８５ 为宜 。 所得数据应能绘出剂量  反应曲线并能测出 ＬＤ ５０ 。 剂量选择可采用较大组距和较少动物进行预试验 。 如果受试物毒性很低 ， 也可采用一次限量 ５０００ｍｇ ／ ｋｇ 体重染毒 。 ６ ． ４ 　 饲养环境和条件 饲养环境和条件应符合 ＧＢ１４９２５ 的有关规定 。 喂饲常规动物饲料 ， 饮水量不限 。 试验前动物应在饲养环境中至少检疫 、 适应 ３ｄ 。 ６ ． ５ 　 试验步骤 ６ ． ５ ． １ 　 试验前的准备 试验前 ， 大鼠禁食过夜 ， 不限制饮水 。 若采用代谢率高的其他动物 ， 禁食时间可以适当缩短 。 ６ ． ５ ． ２ 　 预试验 可查阅有关资料和文献确定预试验剂量 。 如无法获得毒理学信息 ， 一般采用 １０ｍｇ ／ ｋｇ 体重 、 １００ｍｇ ／ ｋｇ 体重和 １０００ｍｇ ／ ｋｇ 体重三个剂量 ， 每个剂量经口染毒 ２ 只 ～ ３ 只动物 。 染毒后 ２４ｈ 内 ， １０ｍｇ ／ ｋｇ 体重和 １００ｍｇ ／ ｋｇ 体重剂量组动物未出现死亡 ， 而 １０００ｍｇ ／ ｋｇ 体重剂量组动物全部死亡 ， ２ 犌犅 ／ 犜