书 书 书犐犆犛 ６５ ． １２０ 犅 ４６ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２３１８２ — ２００８ 饲料中兽药及其他化学物检测试验规程 犘狉狅犮犲犱狌狉犲犳狅狉狏犲狋犲狉犻狀犪狉狔犱狉狌犵犪狀犱狅狋犺犲狉犮犺犲犿犻犮犪犾狊 犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犻狀犳犲犲犱狊 ２００８  １２  ３１ 发布 ２００９  ０５  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ７６ ） 提出并归口 。 本标准负责起草单位 ： 中国农业大学动物医学院 、 中国兽医药品监察所 。 本标准主要起草人 ： 沈建忠 、 徐士新 、 张素霞 、 程林丽 、 常碧影 、 吴聪明 、 江海洋 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２３１８２ — ２００８ 饲料中兽药及其他化学物检测试验规程 １ 　 范围 本标准规定了对饲料中药物 、 微量化学添加剂和化学污染物检测试验的基本要求 （ 包括检测方法确 立 、 检测方法性能检验 、 标准曲线制作 、 检出物确证 、 结果计算与表述 、 试验报告撰写等 ）。 本标准适用于指导配合饲料 、 浓缩饲料及添加预混合饲料中兽药 、 违禁使用药物及其他化学污染物 的仪器分析试验 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ１４６９９．１ 　 饲料 　 采样 （ ＧＢ ／ Ｔ１４６９９．１ — ２００５ ， ＩＳＯ６４９７ ： ２００２ ， ＩＤＴ ） ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ 灵敏度 　 狊犲狀狊犻狋犻狏犻狋狔 分析方法对单位浓度或单位量待测物变化可产生的响应量的变化程度 。 ３ ． ２ 检测限 　 犾犻犿犻狋狅犳犱犲狋犲犮狋犻狅狀 ； 犔犗犇 分析方法在给定的置信度内可以从样品背景信号中检出被测物的最低量 （ 或最低浓度 ）， 但不一定 准确定量 。 ３ ． ３ 定量限 　 犾犻犿犻狋狅犳狇狌犪狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀 ； 犔犗犙 分析方法在满足定量要求 （ 精密度及准确度 ） 的前提下 ， 能定量测出样品中被测物的最低量 （ 或最低 浓度 ）。 ３ ． ４ 准确度 　 犪犮犮狌狉犪犮狔 样品中待测物测定值 （ 结果 ） 与被测量真值或约定真值间的一致程度 。 ３ ． ５ 回收率 　 狉犲犮狅狏犲狉狔 已知确切含量样品中的待测物或添加到空白样品中的测试物测定值占其真实值的百分比 。 ３ ． ６ 精密度 　 狆狉犲犮犻狊犻狅狀 分析方法重复测定同一样品所得测定值间的一致程度 。 ３ ． ７ 相对标准偏差 　 狉犲犾犪狋犻狏犲狊狋犪狀犱犪狉犱犱犲狏犻犪狋犻狅狀 ； 犚犛犇 变异系数 　 犮狅犲犳犳犻犮犻犲狀狋狅犳狏犪狉犻犪狋犻狅狀 ； 犆犞 多次测定值的标准差 （ ＳＤ ） 与算术平均值的百分比 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２３１８２ — ２００８ ３ ． ８ 重复性 　 狉犲狆犲犪狋犪犫犻犾犻狋狔 在重复性条件下 ， 相互独立的测试结果之间的一致程度 。 ３ ． ９ 重复性条件 　 狉犲狆犲犪狋犪犫犻犾犻狋狔犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊 在同一实验室 ， 由同一操作者使用相同设备和试剂 ， 按相同的测试方法 ， 并在短时间内从同一被测 对象取得相互独立结果的条件 。 ３ ． １０ 再现性 　 狉犲狆狉狅犱狌犮犻犫犻犾犻狋狔 在再现性条件下 ， 测试结果之间的一致程度 。 ３ ． １１ 再现性条件 　 狉犲狆狉狅犱狌犮犻犫犻犾犻狋狔犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊 在不同的实验室 ， 由不同的操作者使用不同的设备和试剂 ， 按相同的测试方法 ， 从同一被测对象取 得测试结果的条件 。 ３ ． １２ 线性范围 　 犾犻狀犲犪狉狉犪狀犵犲 被测物浓度与仪器响应值呈线性关系并且能满足定量要求 （ 精密度和准确度 ） 的浓度范围 。 ４ 　 饲料采样 按照 ＧＢ ／ Ｔ１４６９９．１ 规定的方法和程序进行 。 采样对象只限于各种配合饲料 、 浓缩饲料及添加预 混合饲料 （ 包括颗粒状 、 粉状 、 半固体状及液体状饲料 ）。 ５ 　 饲料中兽药及其他化学物的检测 ５ ． １ 　 检测方法确立及基本要求 检测方法可选择国际标准化组织 （ ＩＳＯ ）、 联合国粮农组织 ／ 世界卫生组织 （ ＦＡＯ ／ ＷＨＯ ） 或其他机构 推荐的方法 ， 欧盟 、 美国等先进地区 、 国家的标准 ， 我国国家标准方法或文献报道的经确证的方法 ， 也可 根据自己实验室条件 ， 针对样品基质种类和待测物理化性质确定相应的提取 、 净化方法和仪器检测条 件 ， 建立标准操作程序 （ 步骤 ）。 但所有确立的检测方法都要进行方法验证 ， 即进行方法性能检验 ， 证明 所选方法符合分析要求 、 切实可行 。 采用仪器方法检验时 ， 首先需要建立药物与仪器响应之间的关系 ， 通常采用标准曲线来表示 。 利用 不少于 ５ 点 （ 不包括原点 ） 的实验数据算出待测物与仪器响应值之间的线性回归方程并计算相关系数 （ 狉 ）； 以待测物的绝对量 （ 如 μ ｇ ） 或浓度 （ 如 μ ｇ ／ ｍＬ ） 为横坐标 ， 响应值 （ 峰高或峰面积 ） 为纵坐标制作标准 曲线 ， 确定线性范围 。 线性相关系数应该大于 ０．９９ 。 ５ ． ２ 　 单一实验室的方法验证 ——— 方法的性能检验 主要由标准曲线 、 检测限 、 定量限 、 准确度和精密度来衡量 。 ５ ． ２ ． １ 　 标准曲线 相关论述见 ５．１ 。 ５ ． ２ ． ２ 　 检测限 、 定量限 检测限用于考虑方法是否具备灵敏的检测能力 。 常根据检测对象 、 检测目的不同对检测方法的检 测限作出具体规定 。 当样品中的被测物为允许添加药物或其他化学物时 ， 分析方法的检测限至少应为允许添加浓度的 １ ／ ２ ～ １ ／ ５ ； 当样品中的被测物为违禁使用药物时 ， 分析方法的检测限应足够低 。 确定检测限时 ， 需指出 其确定标准如待测物信号与噪声的比例 ， 即信 ／ 噪比 ≥ ３ 或其他 。 定量限则可确定为校准曲线的最低点 ２ 犌犅 ／ 犜 ２３１８２ — ２００８ 或信 ／ 噪比 ≥ １０ 等 。 ５ ． ２ ． ３ 　 准确度 检测方法的准确度可用方法加标回收率表示 。 用添加法测定方法回收率 ， 原则上添加浓度应以接近样品中待测药物的浓度为宜 。 但由于样品中 待测药物浓度是未知的 ， 因此 ， 对于允许添加药物或其他化学物 ， 一般应选择允许添加浓度的 ０．５ 倍 、 １ 倍和 ２ 倍 ３ 个浓度水平用添加法测定方法回收率 ； 对于饲料中的违禁使用药物 ， 则应选择定量限和高 于定量限 ２ 倍 ～ １０ 倍的 ２ 个浓度水平用添加法测定方法回收率 。 每一个浓度 ５ 个样 ， 重复试验次数不 少于 ３ 次 。 不同添加浓度的回收率要求见表 １ 。 表 １ 　 不同添加浓度的回收率要求 添加浓度 犮 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） 平均回收率 ／ ％ 犮 ＞ １．０ ７０ ～ １１０ ０．１ ＜ 犮 ≤ １．０ ６０ ～ １２０ 犮 ≤ ０．１ ５０ ～ １２０ ５ ． ２ ． ４ 　 精密度 精密度常用重复性和再现性衡量 ， 而重复性又以室内相对标准偏差 （ 犚犛犇 ） 或变异系数 （ 犆犞 ） 表示 。 再现性则以室间相对标准偏差 （ 犚犛犇 ） 或变异系数 （ 犆犞 ） 表示 。 由于相对标准偏差与样品中待测物添加浓度相关 ， 在进行样品中待测物室内 犚犛犇 测定时 ， 需制备 不同添加浓度的试样 （ 如 １ ２ 犡 ， 犡 和 ２ 犡 ）， 各测定 ３ 次或在允许添加浓度 犡 下至少测定 ５ 次来确定 。 样 品中不同浓度待测物的室间相对标准偏差要求见 Ｈｏｒｗｉｔｇ 公式 。 室内相对标准偏差约为室间的 ０．３３ 倍 ～ ０．５ 倍之间 。 Ｈｏｒｗｉｔｇ 公式 ： 犚犛犇 犚 ＝２× （ １－０．５ｌｇ 犮 ） ５ ． ３ 　 多个实验室间的方法验证 对检测标准方法或公用方法进行多个实验室间的验证试验时 ， 对于等同采用的国外标准 、 修改采用 的国外标准以及参考国外方法建立的检测方法标准 ， 方法由 １ 个实验室建立后要经另外 ２ 个实验室进 行复核 ； 对于原创性的检测方法 ， 则应由 ３ 个 ～ ５ 个实验室进行验证 。 若参加验证试验的实验室为 ２ 个 ， 则所提供的结果数据要在统计估计的置信区间内 。 验证试验时 ， 应对方法检测限和定量限进行复核 。 验证试验时 ， 添加回收率测定一般选择 ０．５ 倍允许添加浓度 、 １ 倍允许添加浓度和 ２ 倍允许添加浓 度 ３ 个浓度水平 。 若添加物为违禁使用药物 ， 则应选择定量限和高于定量限 ２ 倍 ～ １０ 倍的 ２ 个浓度水 平用添加法测定方法回收率 。 每一个浓度 ５ 个样 ， 重复试验次数不少于 ３ 次 。 实验室内部或不同实验室间进行验证试验 ， 对不同添加浓度的精密度 （ 包括重复性和再现性 ） 要求 见表 ２ 。 表 ２ 　 复核试验不同添加浓度的精密度要求 待测物添加浓度 犮 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） 变异系数 犆犞 ／ ％ 重 　 复 　 性 再 　 现 　 性 犮 ＞ １０ １０ １６ １ ＜ 犮 ≤ １０ １５ ２３ ０