书 书 书犐犆犛 ６７ ． １８０ ． １０ 犡 ３１ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２３１９２ — ２００８ 蜂蜜中淀粉粒的测定方法 显微镜计数法 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狋犪狉犮犺犵狉犪犻狀狊犻狀犺狅狀犲狔 — 犆狅狌狀狋狑犻狋犺犿犻犮狉狅狊犮狅狆犲 ２００８  １２  ３１ 发布 ２００９  ０６  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准由中华全国供销合作总社提出并归口 。 本标准起草单位 ： 北京市蜂产品研究所 、 北京百花蜂产品科技发展有限公司 。 本标准主要起草人 ： 马兰宇 、 陈晓霞 、 郭利军 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２３１９２ — ２００８ 引 　　 言 　　 本标准对设备要求简单 ， 操作易行 ， 易于推广 。 适用于各类基层经营组织的质量控制需要 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ２３１９２ — ２００８ 蜂蜜中淀粉粒的测定方法 显微镜计数法 １ 　 范围 本标准规定了蜂蜜中淀粉颗粒的测定方法 。 本标准适用于定性和计数测定蜂蜜中的淀粉粒 。 本标准不适用于蜂蜜制品 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 （ ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ ， ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ３ 　 原理 蜂蜜样品中的淀粉颗粒可以与碘结合生成蓝色络合物 ， 在显微镜下可以观测计数 。 当淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例不同时 ， 颜色可能会呈现出蓝色 、 紫色或红色等 。 ４ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 在分析中至少使用分析纯试剂 。 所用水为蒸馏水或去离子水 ， 水应符合 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 中 三级水的标准 。 ４ ． １ 　 碘  碘化钾溶液 （ ０．３％ ）： 称 ３ｇ 碘 、 ６ｇ 碘化钾 ， 溶解后 ， 用水定容至 １０００ｍＬ 。 ４ ． ２ 　 血球计数器 （ ２５×１６ ）。 ４ ． ３ 　 锥形刻度离心管 （ １５ｍＬ ）： 最小刻度 ０．１ｍＬ 。 ４ ． ４ 　 吸管 （ １０ｍＬ ）。 ４ ． ５ 　 滴管 。 ４ ． ６ 　 盖玻片 。 ５ 　 仪器设备 ５ ． １ 　 离心机 （ ３０００ｒ ／ ｍｉｎ ）。 ５ ． ２ 　 显微镜 （ ×１００ 、 ×４００ ）。 ５ ． ３ 　 天平 （ 感量 ０．０１ｇ ）。 ６ 　 试样的制备 ６ ． １ 　 称取均匀蜜样 ２．０ｇ ， 加水 ２０ｍＬ ， 煮沸冷却 。 此试样溶液用于定性测试 。 ６ ． ２ 　 称取均匀蜂蜜 ５０．０ｇ ， 加水 ２５ｍＬ 稀释 ， 混匀 。 此试样溶液用于显微镜计数测试 。 ７ 　 分析步骤 ７ ． １ 　 定性测试 取蜂蜜试样溶液 （ ６．１ ） 少许 ， 加碘液 ２ 滴 ， 颜色不变者为不含淀粉的蜂蜜 ； 若呈蓝色 、 绿色 、 紫色为掺 有淀粉 ， 若呈红色则加了糊精 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２３１９２ — ２００８ ７ ． ２ 　 显微镜计数测试 ７ ． ２ ． １ 　 试样溶液 ： 准确吸取样品制备液 （ ６．２ ） １０ｍＬ ， 置于锥形离心管中 ， 离心 ３０ｍｉｎ 后取出 ， 用滴管 吸去上清液 ， 可适度增加洗涤次数 。 加入蒸馏水至 ０．１ｍＬ ， 用细玻璃棒轻轻搅匀离心管底部的沉淀物 ， 然后加 １ 滴碘液 ， 供显微镜测定用 。 ７ ． ２ ． ２ 　 显微计数 ： 取清洁干燥的血球计数器 ， 盖上盖玻片 （ 注意盖玻片要盖在计数室上 ）， 然后用小滴管 吸取均匀的样液 ， 由盖玻片边缘滴一小滴 （ 不宜过多 ）， 样液自行渗入 ， 注意不可有气泡产生 。 将血球计 数器置于显微镜载物台上 ， 先用低倍镜找到计数室所在位置 ， 然后换成高倍镜进行计数 （ 一般用 １００ 倍 显微镜观察计数 ）。 分别记下每个视野中计数室的花粉粒数和淀粉粒数 。 每个样品观察测定 ４ 个计数 室的花粉粒数和淀粉粒数 。 ８ 　 计算与表述 蜂蜜中淀粉颗粒含量的计算见式 （ １ ）， 稀释因子的计算见式 （ ２ ）。 犡 ＝ 犖 犿 × 犃 × １００ …………………………（ １ ） 犃 ＝ 犞 ２ 犿 ＋ 犞 １ …………………………（ ２ ） 　　 式中 ： 犡 ——— 每 １００ｇ 蜂蜜中淀粉颗粒数 ， 单位为个 ； 犖 ——— 观察到的淀粉颗粒数 ， 单位为个 ； 犿 ——— 称样量 ， 单位为克 （ ｇ ）； 犃 ——— 稀释因子或稀释倍数 ； 犞 ２ ——— 吸取的离心溶液量 ， 单位为克 （ ｇ ） 或毫升 （ ｍＬ ）； 犞 １ ——— 稀释样品时加入的水量 ， 单位为克 （ ｇ ） 或毫升 （ ｍＬ ）。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２３１９２ — ２００８