书 书 书犐犆犛 ０７ ． １００ ． ３０ 犡 ６０ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２４４０１ — ２００９ α  淀粉酶制剂 犃犾狆犺犪犪犿狔犾犪狊犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀 ２００９  ０９  ３０ 发布 ２０１０  ０３  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准以 ＱＢ ／ Ｔ１８０５．１ — １９９３ 《 工业用 α  淀粉酶制剂 》 和 ＱＢ ／ Ｔ２３０６ — １９９７ 《 耐高温 α  淀粉酶制 剂 》 为基础 ， 首次制定 。 本标准的附录 Ａ 为规范性附录 ， 附录 Ｂ 、 附录 Ｃ 为资料性附录 。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出 。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会工业发酵分技术委员会归口 。 本标准起草单位 ： 中国食品发酵工业研究院 、 无锡赛德生物工程有限公司 、 山东隆大生物工程有限 公司 、 诺维信 （ 中国 ） 生物技术有限公司 、 江阴市百圣龙生物工程有限公司 、 邢台新欣翔宇生物工程有限 责任公司 。 本标准主要起草人 ： 张蔚 、 吴炳炎 、 郭庆文 、 张晶雪 、 顾建龙 、 余波 、 郭新光 、 胡洪清 、 杨西江 、 曹振宇 、 陆志冲 、 魏坤 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２４４０１ — ２００９ α  淀粉酶制剂 １ 　 范围 本标准规定了 α  淀粉酶制剂的术语和定义 、 产品分类 、 要求 、 试验方法 、 检验规则和标志 、 包装 、 运 输 、 贮存要求 。 本标准适用于以淀粉质 （ 或糖质 ） 为原料 ， 经发酵 、 提纯制得的 α  淀粉酶制剂产品的生产 、 检验和销 售 。 主要用于食品工业 、 纺织工业等 。 其他来源的 α  淀粉酶制剂可参照相关类别使用 ， 用作饲料添加 剂的 α  淀粉酶制剂可参照 Ａ 类产品执行 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ１９１ 　 包装储运图示标志 ＧＢ ／ Ｔ６０１ 　 化学试剂 　 标准滴定溶液的制备 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ＧＢ８２７５ 　 食品添加剂 　 α  淀粉酶制剂 ＱＢ ／ Ｔ１８０３ — １９９３ 　 工业酶制剂通用试验方法 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ α  淀粉酶 　 犪犾狆犺犪犪犿狔犾犪狊犲 能水解淀粉分子链中的 α １ ， ４ 葡萄糖苷键 ， 将淀粉链切断成为短链糊精和少量麦芽糖和葡萄糖 ， 使 淀粉粘度迅速下降的酶 。 ３ ． ２ 中温 α  淀粉酶活力 　 犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犿犲犱犻狌犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲犪犾狆犺犪犪犿狔犾犪狊犲 １ｇ 固体酶粉 （ 或 １ｍＬ 液体酶 ）， 于 ６０℃ 、 ｐＨ 值 ６．０ 条件下 ， １ｈ 液化 １ｇ 可溶性淀粉 ， 即为 １ 个酶 活力单位 ， 以 “ ｕ ／ ｇ （ ｕ ／ ｍＬ ）” 表示 。 ３ ． ３ 耐高温 α  淀粉酶活力 　 犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犺犲犪狋狋狅犾犲狉犪狀狋犪犾狆犺犪犪犿狔犾犪狊犲 １ｇ 固体酶粉 （ 或 １ｍＬ 液体酶 ）， 于 ７０℃ 、 ｐＨ 值 ６．０ 条件下 ， １ｍｉｎ 液化 １ｍｇ 可溶性淀粉 ， 即为 １ 个酶活力单位 ， 以 “ ｕ ／ ｇ （ ｕ ／ ｍＬ ）” 表示 。 ４ 　 产品分类 ４ ． １ 　 按产品的应用领域 Ａ 类 ： 食品 ／ 饲料工业用酶 。 Ｂ 类 ： 其他工业用酶 。 ４ ． ２ 　 按产品的适用温度 中温 α  淀粉酶制剂和耐高温 α  淀粉酶制剂 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２４４０１ — ２００９ ４ ． ３ 　 按产品形态 液体剂型酶制剂和固体剂型酶制剂 。 ５ 　 要求 ５ ． １ 　 外观 固体剂型 ： 白色至黄褐色固体粉末 。 无霉变 、 潮解 、 结块现象 ， 无异味 。 易溶于水 。 液体剂型 ： 黄褐色至深褐色液体 ， 无异味 ， 允许有少量凝聚物 。 ５ ． ２ 　 理化要求 应符合表 １ 的规定 。 表 １ 　 α  淀粉酶制剂的理化要求 项 　　 目 液体剂型 固体剂型 中温 α  淀粉酶制剂耐高温 α  淀粉酶制剂中温 α  淀粉酶制剂耐高温 α  淀粉酶制剂 Ａ 类 Ｂ 类 Ａ 类 Ｂ 类 Ａ 类 Ｂ 类 Ａ 类 Ｂ 类 酶活力 ａ ／［ ｕ ／ ｍＬ （ 或 ｕ ／ ｇ ）］ ≥ ２０００ ２００００ ２０００ ２００００ ｐＨ 值 （ ２５℃ ） ５．５ ～ ７．０ ５．８ ～ ６．８ — 容重 ／（ ｇ ／ ｍＬ ） １．１０ ～ １．２５ １．１０ ～ １．２５ — 干燥失重 ／ ％ ≤ — ８．０ 耐热性存活率 ／ ％ ≥ — ９０ — ９０ 　　 注 ： Ｂ 类产品不得用于食品工业和饲料工业 （ 蒸馏酒类除外 ）。 　　 ａ 具体规格可按供需双方合同规定的酶活力规格执行 。 ５ ． ３ 　 卫生要求 Ｂ 类产品不做卫生要求 ， Ａ 类产品按 ＧＢ８２７５ 中卫生要求执行 。 ６ 　 试验方法 本标准中所用的水 ， 在未注明其他要求时 ， 均指符合 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 中要求的水 。 本标准中所用的试剂 ， 在未注明规格时 ， 均指分析纯 （ ＡＲ ）。 若有特殊要求另作明确规定 。 本标准中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时 ， 均指水溶液 。 ６ ． １ 　 外观 称取样品 １０ｇ （ 或 １０ｍＬ ）， 观察 、 嗅闻作出判断 ， 做好记录 。 ６ ． ２ 　 酶活力 ６ ． ２ ． １ 　 原理 α  淀粉酶制剂能将淀粉分子链中的 α １ ， ４ 葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精 、 少量麦芽 糖和葡萄糖 ， 而使淀粉对碘呈蓝紫色的特性反应逐渐消失 ， 呈现棕红色 ， 其颜色消失的速度与酶活性有 关 ， 据此可通过反应后的吸光度计算酶活力 。 ６ ． ２ ． ２ 　 试剂和溶液 ６ ． ２ ． ２ ． １ 　 碘 。 ６ ． ２ ． ２ ． ２ 　 碘化钾 。 ６ ． ２ ． ２ ． ３ 　 原碘液 ： 称取 １１．０ｇ 碘和 ２２．０ｇ 碘化钾 ， 用少量水使碘完全溶解 ， 定容至 ５００ｍＬ ， 贮存于棕 色瓶中 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２４４０１ — ２００９ ６ ． ２ ． ２ ． ４ 　 稀碘液 ： 吸取原碘液 ２．００ｍＬ ， 加 ２０．０ｇ 碘化钾用水溶解并定容至 ５００ｍＬ ， 贮存于棕色 瓶中 。 ６ ． ２ ． ２ ． ５ 　 可溶性淀粉溶液 （ ２０ｇ ／ Ｌ ）： 称取 ２．０００ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ） 可溶性淀粉 （ 以绝干计 ） 于烧杯中 ， 用少量水调成浆状物 ， 边搅拌边缓缓加入 ７０ｍＬ 沸水中 ， 然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯 ， 洗液倒入其 中 ， 搅拌加热至完全透明 ， 冷却定容至 １００ｍＬ 。 溶液现配现用 。 注 ： 可溶性淀粉采用酶制剂专用可溶性淀粉 。 ６ ． ２ ． ２ ． ６ 　 磷酸缓冲液 （ ｐＨ＝６．０ ）： 称取 ４５．２３ｇ 磷酸氢二钠 （ Ｎａ ２ ＨＰＯ ４ · １２Ｈ ２ Ｏ ） 和 ８．０７ｇ 柠檬酸 （ Ｃ ６ Ｈ ８ Ｏ ７ · Ｈ ２ Ｏ ）， 用水溶解并定容至 １０００ｍＬ 。 用 ｐＨ 计校正后使用 。 ６ ． ２ ． ２ ． ７ 　 盐酸溶液 ［ 犮 （ ＨＣｌ ） ＝０．１ｍｏｌ ／ Ｌ ］： 按 ＧＢ ／ Ｔ６０１ 配制 。 ６ ． ２ ． ３ 　 仪器和设备 除实验室常规仪器外还有以下仪器和设备 。 ６ ． ２ ． ３ ． １ 　 分光光度计 。 ６ ． ２ ． ３ ． ２ 　 恒温水浴 ： 精度 ±０．１℃ 。 ６ ． ２ ． ３ ． ３ 　 自动移液器 。 ６ ． ２ ． ３ ． ４ 　 试管 ： ２５ｍｍ×２００ｍｍ 。 ６ ． ２ ． ３ ． ５ 　 秒表 。 ６ ． ２ ． ４ 　 分析步骤 ６ ． ２ ． ４ ． １ 　 待测酶液的制备 称取 １ｇ ～ ２ｇ 酶粉 （ 精确至 ０．０００１ｇ ） 或准确吸取酶液 １．００ｍＬ ， 用少量磷酸缓冲液 （ ６．２．２．６ ） 充 分溶解 ， 将上清液小心倾入容量瓶中 ， 若有剩余残渣 ， 再加少量磷酸缓冲液 （ ６．２．２．６ ） 充分研磨 ， 最终样 品全部移入容量瓶中 ， 用磷酸缓冲液 （ ６．２．２．６ ） 定容至刻度 ， 摇匀 。 用四层纱布过滤 ， 滤液待用 。 　　 注 ： 待测中温 α  淀粉酶酶液酶活力浓度控制在 ３．４ｕ ／ ｍＬ ～ ４．５ｕ ／ ｍＬ 范围内 ， 待测耐高温 α  淀粉酶活力浓度控制 在 ６０ｕ ／ ｍＬ ～ ６５ｕ ／ ｍＬ 范围内 。 ６ ． ２ ． ４ ． ２ 　 测定 吸取 ２０．０ｍＬ 可溶性淀粉溶液 （ ６．２．２．５ ） 于试管 （ ６．２．３．４ ） 中 ， 加入磷酸缓冲液 （ ６．２．２．６ ） ５．００ｍＬ ， 摇匀后 ， 置于 ６０℃±０．２℃ （ 耐高温 α  淀粉酶制剂置于 ７０℃±０．２℃ ） 恒温水浴中预热 ８ｍｉｎ 。 加入 １．００ｍＬ 稀释好的待测酶液 （ ６．２．４．１ ）， 立即计时 ， 摇匀 ， 准确反应 ５