书 书 书犐犆犛 ６７ ． ２００ ． １０ 犡 １４ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ５５３７ — ２００８ 代替 ＧＢ ／ Ｔ５５３７ — １９８５ 粮油检验 　 磷脂含量的测定 犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀狅犳犵狉犪犻狀犪狀犱狅犻犾狊 — 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆犺狅狊狆犺犪狋犻犱犲犮狅狀狋犲狀狋 ２００８  １１  ０４ 发布 ２００９  ０１  ２０ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书中华人民共和国 国家标准 粮油检验 　 磷脂含量的测定 ＧＢ ／ Ｔ５５３７ — ２００８  中国标准出版社出版发行 北京复兴门外三里河北街 １６ 号 邮政编码 ： １０００４５ 网址 ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ 电话 ： ６８５２３９４６ 　 ６８５１７５４８ 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销  开本 ８８０×１２３０１ ／ １６ 　 印张 ０．５ 　 字数 ９ 千字 ２００９ 年 １ 月第一版 　 ２００９ 年 １ 月第一次印刷  书号 ： １５５０６６ · １３５５０４ 如有印装差错 　 由本社发行中心调换 版权专有 　 侵权必究 举报电话 ：（ ０１０ ） ６８５３３５３３ 书 书 书前 　　 言 　　 本标准的第一法参考了美国油脂化学协会 ＡＯＣＳＯｆｆｉｃｉａｌＭｅｔｈｏｄＣａ１２５５ 《 磷 》（ 英文版 ）。 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ５５３７ — １９８５ 《 植物油脂检验 　 磷脂测定法 》。 本标准与 ＧＢ ／ Ｔ５５３７ — １９８５ 的主要技术差异为 ： ——— 标准名称由 《 植物油脂检验 　 磷脂测定法 》 改为 《 粮油检验 　 磷脂含量的测定 》； ——— 修改了标准储备液制备中磷酸二氢钾的称样量 ； ——— 修改了比色皿的规格 ； ——— 修改了空白调零时使用的试样 ； ——— 修改了制备被测液时称样量 ； ——— 修改了结果计算的方式 。 本标准国家粮食局提出 。 本标准由全国粮油标准化技术委员会归口 。 本标准起草单位 ： 中粮北海粮油工业 （ 天津 ） 有限公司 。 本标准主要起草人 ： 郝克非 、 李学红 。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 ： ——— ＧＢ ／ Ｔ５５３７ — １９８５ 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ５５３７ — ２００８ 粮油检验 　 磷脂含量的测定 １ 　 范围 本标准规定了植物油脂中磷脂含量测定的术语和定义 、 原理 、 仪器和用具 、 试剂和溶液 、 操作步骤 、 结果计算和重复性 。 本标准适用于植物原油 、 脱胶油及成品油 。 本标准第一法为仲裁法 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ５５２４ 　 动植物油脂 　 扦样 ＧＢ ／ Ｔ１５６８７ 　 动植物油脂 　 试样的制备 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ 磷脂 　 狆犺狅狊狆犺犪狋犻犱犲 由甘油 、 脂肪酸 、 磷酸 、 氨基醇和环醇等构成的化合物 。 第一法 　 钼蓝比色法 ４ 　 原理 植物油中的磷脂经灼烧成为五氧化二磷 ， 被热盐酸变成磷酸 ， 遇钼酸钠生成磷钼酸钠 ， 用硫酸联氨 还原成钼蓝 ， 用分光光度计在波长 ６５０ｎｍ ， 测定钼蓝的吸光度 ， 与标准曲线比较 ， 计算其含量 。 ５ 　 仪器和用具 ５ ． １ 　 分光光度计 ： 具 １ｃｍ 比色皿 。 ５ ． ２ 　 分析天平 ： 分度值 ０．０００１ｇ 。 ５ ． ３ 　 马弗炉 ： 可控制温度 ， 主要使用温度在 ５５０℃ ～ ６００℃ 。 ５ ． ４ 　 封闭电炉 ： 可调温 。 ５ ． ５ 　 沸水浴 。 ５ ． ６ 　 瓷坩埚或石英坩埚 ： ５０ｍＬ 、 １００ｍＬ 能承受的最低温度 ６００℃ 。 ５ ． ７ 　 容量瓶 ： １００ｍＬ 、 ５００ｍＬ 、 １０００ｍＬ 。 ５ ． ８ 　 移液管 ： １ｍＬ 、 ２ｍＬ 、 ５ｍＬ 、 １０ｍＬ 。 ５ ． ９ 　 比色管 ： ５０ｍＬ 。 １ 犌犅 ／ 犜 ５５３７ — ２００８ ６ 　 试剂和溶液 警告 ： 使用本标准的人员应有正规实验室工作的实际经验 ， 本标准并未指出所有可能的安全问题 。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施 ， 并保证符合国家有关法律规定的条件 。 所用试剂均为分析纯 ， 水为蒸馏水 。 ６ ． １ 　 盐酸 ： １．１９ｇ ／ ｍＬ 。 ６ ． ２ 　 氧化锌 。 ６ ． ３ 　 氢氧化钾 。 ６ ． ４ 　 浓硫酸 ： １．８４ｇ ／ ｍＬ 。 ６ ． ５ 　 钼酸钠 。 ６ ． ６ 　 硫酸联氨 。 ６ ． ７ 　 磷酸二氢钾 ： 使用前在 １０１℃ 下干燥 ２ｈ 。 ６ ． ８ 　 ２．５％ 钼酸钠稀硫酸溶液 ： 量取 １４０ｍＬ 浓硫酸 （ ６．４ ）， 注入到 ３００ｍＬ 水中 。 冷却至室温 ， 加入 １２．５ｇ 钼酸钠 ， 溶解后用水定容至 ５００ｍＬ ， 充分摇匀 ， 静置 ２４ｈ 备用 。 ６ ． ９ 　 ０．０１５％ 硫酸联氨溶液 ： 将 ０．１５ｇ 硫酸联氨 （ ６．６ ） 溶解在 １Ｌ 水中 。 ６ ． １０ 　 ５０％ 氢氧化钾溶液 ： 将 ５０ｇ 氢氧化钾 （ ６．３ ） 溶解在 ５０ｍＬ 水中 。 ６ ． １１ 　 １∶１ 盐酸溶液 ： 将盐酸 （ ６．１ ） 溶解在等体积的水中 。 ６ ． １２ 　 磷酸盐标准储备液 ： 称取干燥的磷酸二氢钾 （ ６．７ ） ０．４３８７ｇ ， 用水溶解并稀释定容至 １０００ｍＬ ， 此溶液含磷 ０．１ｍｇ ／ ｍＬ 。 ６ ． １３ 　 标准曲线用磷酸盐标准溶液 ： 用移液管吸取标准储备液 （ ６．１２ ） １０ｍＬ 至 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 加水 稀释并定容 。 此溶液含磷 ０．０１ｍｇ ／ ｍＬ 。 ７ 　 操作步骤 ７ ． １ 　 扦样 按 ＧＢ ／ Ｔ５５２４ 执行 。 ７ ． ２ 　 试样的制备 按 ＧＢ ／ Ｔ１５６８７ 执行 。 ７ ． ３ 　 绘制标准曲线 取六支比色管 （ ５．９ ）， 编成 ０ 、 １ 、 ２ 、 ４ 、 ６ 、 ８ 六个号码 。 按号码顺序分别注入标准溶液 （ ６．１３ ） ０ｍＬ 、 １ｍＬ 、 ２ｍＬ 、 ４ｍＬ 、 ６ｍＬ 、 ８ｍＬ ， 再按顺序分别加水 １０ｍＬ 、 ９ｍＬ 、 ８ｍＬ 、 ６ｍＬ 、 ４ｍＬ 、 ２ｍＬ 。 接着向六 支比色管中分别加入硫酸联氨溶液 （ ６．９ ） ８ｍＬ ， 钼酸钠溶液 （ ６．８ ） ２ｍＬ 。 加塞 ， 振摇 ３ 次 ～ ４ 次 ， 去塞 ， 将比色管放入沸水浴 （ ５．５ ） 中加热 １０ｍｉｎ ， 取出 ， 冷却至室温 。 用水稀释至刻度 ， 充分摇匀 ， 静置 １０ｍｉｎ 。 移取该溶液至干燥 、 洁净的比色皿中 ， 用分光光度计在 ６５０ｎｍ 处 ， 用试剂空白调整零点 ， 分别 测定吸光度 。 以吸光度为纵坐标 ， 含磷量 （ ０．０１ｍｇ 、 ０．０２ｍｇ 、 ０．０４ｍｇ 、 ０．０６ｍｇ 、 ０．０８ｍｇ ） 为横坐标绘 制标准曲线 。 ７ ． ４ 　 制备试液 根据试样的磷脂含量 ， 用坩埚 （ ５．６ ） 称取制备好的试样 （ ７．２ ）， 成品油试样称量 １０ｇ ， 原油及脱胶油 称量 ３．０ｇ ～ ３．２ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ）。 加氧化锌 （ ６．２ ） ０．５ｇ ， 先在电炉上缓慢加热至样品变稠 ， 逐渐加 热至全部炭化 ， 将坩埚送至 ５５０℃ ～ ６００℃ 的马弗炉中灼烧至完全灰化 （ 白色 ）， 时间约 ２ｈ 。 取出坩埚 冷却至室温 ， 用 １０ｍＬ 盐酸溶液 （ ６．１１ ） 溶解灰分并加热至微沸 ， ５ｍｉｎ 后停止加热 ， 待溶解液温度降至 室温 ， 将溶解液过滤注入 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 每次用大约 ５ｍＬ 热水冲洗坩埚和滤纸共 ３ 次 ～ ４ 次 ， 待滤 液冷却到室温后 。 用氢氧化钾溶液 （ ６．１０ ） 中和至出现混浊 ， 缓慢滴加盐酸溶液 （ ６．１１ ） 使氧化锌沉淀全 部溶解 ， 再加 ２ 滴 。 最后用水稀释定容至刻度 ， 摇匀 。 制备被测液时同时制备一份样品空白 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ５５３７ — ２００８ ７ ． ５ 　 比色 用移液管吸取被测液 （ ７．４ ） １０ｍＬ ， 注入 ５０ｍＬ 比色管中 。 加入硫酸联氨溶液 （ ６．９ ） ８ｍＬ ， 钼酸钠 溶液 （ ６．８ ） ２ｍＬ 。 加塞 ， 振摇 ３ 次 ～ ４ 次 ， 去塞 ， 将比色管放入沸水浴中加热 １０ｍｉｎ ， 取出 ， 冷却至室温 。 用水稀释至刻度 ， 充分摇匀 ， 静置 １０ｍｉｎ 。 移取该溶液至干燥 、 洁净的比色皿中 ， 用分光光度计在 ６５０ｎｍ 下 ， 用试样空白调整零点 ， 测定其吸光度 。 ８ 　 结果计算 试样中磷脂含量按式 （ １ ） 计算 ： 犡 ＝ 犘 犿 × 犞 １ 犞 ２ × ２６ ． ３１ …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 犡 ——— 磷脂含量 ， 单位为毫克每克 （ ｍｇ ／ ｇ ）； 犘 ——— 标准曲线查得的被测液的含磷量 ， 单位为毫克 （ ｍｇ ）； 犿 ——— 试样质量 ， 单位为克 （ ｇ ）； 犞