书 书 书犐犆犛 ６５ ． １００ ． ３０ 犌 ２５ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３４１５５ — ２０１７ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 犑犻狀犵犪狀犵犿狔犮犻狀犃狋犲犮犺狀犻犮犪犾犿犪狋犲狉犻犪犾 ２０１７  ０９  ０７ /G27 /G28 ２０１８  ０４  ０１ /G29 /G2A /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G27 /G28书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国石油和化学工业联合会提出 。 本标准由全国农药标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ１３３ ） 归口 。 本标准负责起草单位 ： 沈阳化工研究院有限公司 。 本标准参加起草单位 ： 浙江省桐庐汇丰生物化工有限公司 、 浙江钱江生物化学股份有限公司 、 武汉科诺生物科技股份有限公司 、 福建浦城绿安生物农药有限公司 。 本标准主要起草人 ： 梅宝贵 、 张雪冰 、 闫雪艾 、 朱建新 、 刘荷梅 、 江红 、 郑桐 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３４１５５ — ２０１７ 井冈霉素原药 １ 　 范围 本标准规定了井冈霉素原药的要求 、 试验方法以及标志 、 标签 、 包装 、 贮运 、 安全和验收期 。 本标准适用于由井冈霉素 Ａ 及其生产中产生的杂质组成的井冈霉素原药 。 注 ： 井冈霉素的其他名称 、 结构式和基本物化参数参见附录 Ａ 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ１６０１ 　 农药 ｐＨ 值的测定方法 ＧＢ ／ Ｔ１６０４ 　 商品农药验收规则 ＧＢ ／ Ｔ１６０５ — ２００１ 　 商品农药采样方法 ＧＢ３７９６ 　 农药包装通则 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 　 分析实验室用水规格和试验方法 （ ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ＧＢ ／ Ｔ８１７０ — ２００８ 　 数值修约规则与极限数值的表示和判定 ＧＢ ／ Ｔ２８１３６ 　 农药水不溶物测定方法 ３ 　 要求 ３ ． １ 　 外观 白色至淡黄色粉末 。 ３ ． ２ 　 技术指标 井冈霉素原药还应符合表 １ 要求 。 表 １ 　 井冈霉素原药控制项目指标 项 　　 目 指 　　 标 井冈霉素 Ａ 质量分数 ／ ％ ≥ ６０．０ 干燥减量 ／ ％ ≤ ５．０ 水不溶物 ａ ／ ％ ≤ ０．２ ｐＨ 值范围 ２．５ ～ ５．０ 　　 ａ 正常生产时 ， 水不溶物每 ３ 个月至少测定一次 。 ４ 　 试验方法 安全提示 ： 使用本标准的人员应有实验室工作的实践经验 。 本标准并未指出所有的安全问题 。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施 ， 并保证符合国家有关法规的规定 。 １ 犌犅 ／ 犜 ３４１５５ — ２０１７ ４ ． １ 　 一般规定 本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时 ， 均指分析纯试剂和 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 中规定的三级 水 。 检验结果的判定按 ＧＢ ／ Ｔ８１７０ — ２００８ 中的 ４．３．３ “ 修约值比较法 ” 进行 。 ４ ． ２ 　 抽样 按 ＧＢ ／ Ｔ１６０５ — ２００１ 中 “ 商品原药采样 ” 方法进行 。 用随机数表法确定抽样的包装件 ， 最终抽样量 应不少于 １００ｇ 。 ４ ． ３ 　 鉴别试验 高效液相色谱法 ——— 本鉴别试验可与井冈霉素 Ａ 质量分数的测定同时进行 。 在相同的色谱操作 条件下 ， 试样溶液中某色谱峰的保留时间与标样溶液中井冈霉素 Ａ 色谱峰的保留时间 ， 其相对差值应在 １．５％ 以内 。 ４ ． ４ 　 井冈霉素 犃 质量分数的测定 ４ ． ４ ． １ 　 方法提要 试样用水溶解 ， 以磷酸氢二钠缓冲溶液 ＋ 甲醇为流动相 ， 使用以 Ｃ１８ 为填料的不锈钢柱和紫外检 测器 （ ２１０ｎｍ ）， 对试样中的井冈霉素 Ａ 进行反相高效液相色谱分离 ， 外标法定量 。 ４ ． ４ ． ２ 　 试剂和溶液 甲醇 ： 色谱纯 ； 磷酸 ； 磷酸氢二钠 ； 水 ： 新蒸二次蒸馏水 ； 磷酸氢二钠缓冲溶液 ［ 犮 （ Ｎａ ２ ＨＰＯ ４ ） ＝０．００２５ｍｏｌ ／ Ｌ ］： 称取 ０．３６ｇＮａ ２ ＨＰＯ ４ 于玻璃瓶中 ， 加水超声振荡使之溶解 ， 加水稀释至 １Ｌ ， 摇匀 ， 用磷酸调节该溶液至 ｐＨ６．８ ～ ７．２ ， 过滤 ； 井冈霉素标样 ： 已知井冈霉素 Ａ 质量分数 。 ４ ． ４ ． ３ 　 仪器 高效液相色谱仪 ： 具有紫外可变波长检测器 ； 色谱数据处理机或色谱工作站 ； 色谱柱 ： ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ ｉ．ｄ． ） 不锈钢柱 ， 内装 Ｃ１８ 、 ５ μ ｍ 填充物 ； 过滤器 ： 滤膜孔径约 ０．４５ μ ｍ ； 微量进样器 ： ５０ μ Ｌ ； 定量进样管 ： ５ μ Ｌ ； 超声波清洗器 。 ４ ． ４ ． ４ 　 高效液相色谱操作条件 流动相 ： ψ （ 磷酸氢二钠缓冲溶液 ∶ 甲醇 ） ＝９７∶３ ， 经滤膜过滤 ， 并进行脱气 ； 流速 ： １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； 柱温 ： 室温 ； 检测波长 ： ２１０ｎｍ ； ２ 犌犅 ／ 犜 ３４１５５ — ２０１７ 进样体积 ： ５ μ Ｌ ； 保留时间 ： 井冈霉素 Ａ 约 ７．８ｍｉｎ 。 上述操作参数是典型的 ， 可根据不同仪器特点 ， 对给定的操作参数作适当调整 ， 以期获得最佳效果 。 典型的井冈霉素原药高效液相色谱图见图 １ 。 说明 ： １ ——— 井冈霉素 Ａ 。 图 １ 　 井冈霉素原药的高效液相色谱图 ４ ． ４ ． ５ 　 测定步骤 ４ ． ４ ． ５ ． １ 　 标样溶液的制备 称取含井冈霉素 Ａ０．１ｇ （ 精确至 ０．０００１ｇ ） 的井冈霉素标样 ， 置于 ５０ｍＬ 容量瓶中 ， 加水振摇使之溶解 ， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 。 用移液管移取上述溶液 ５ｍＬ 于 ５０ｍＬ 容量瓶中 ， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 。 ４ ． ４ ． ５ ． ２ 　 试样溶液的制备 称取含井冈霉素 Ａ０．４ｇ 的试样 （ 精确至 ０．０００１ｇ ）， 置于 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 加水振摇使之溶解 ， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 。 用移液管移取上述溶液 ５ｍＬ 于 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 ， 过滤 。 ４ ． ４ ． ５ ． ３ 　 测定 在上述操作条件下 ， 待仪器稳定后 ， 连续注入数针标样溶液 ， 直至相邻两针井冈霉素 Ａ 峰面积相对变化小于 １．２％ 后 ， 按照标样溶液 、 试样溶液 、 试样溶液 、 标样溶液的顺序进行测定 。 ４ ． ４ ． ６ 　 计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中井冈霉素 Ａ 峰面积分别进行平均 。 试样中井冈霉素 Ａ 的质量分数按式 （ １ ） 计算 ： 狑 １ ＝ 犃 ２ · 犿 １ · 狑 · 狀犃 １ · 犿 ２ …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 狑 １ ——— 试样中井冈霉素 Ａ 质量分数 ， 以百分数 （ ％ ） 表示 ； 犃 ２ ——— 试样溶液中 ， 井冈霉素 Ａ 峰面积的平均值 ； 犿 １ ——— 标样的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）； 狑 ——— 标样中井冈霉素 Ａ 的质量分数 ， 以百分数 （ ％ ） 表示 ； 狀 ——— 稀释因子 ， 狀 ＝４ ； ３ 犌犅 ／ 犜 ３４１５５ — ２０１７ 犃 １ ——— 标样溶液中 ， 井冈霉素 Ａ 峰面积的平均值 ； 犿 ２ ——— 试样的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）。 ４ ． ４ ． ７ 　 允许差 井冈霉素 Ａ 质量分数两次平行测定结果之差应不大于 １．０％ ， 取其算术平均值作为测定结果 。 ４ ． ５ 　 干燥减量的测定 ４ ． ５ ． １ 　 仪器 烘箱 ： １０５℃±２℃ ； 称量瓶 ： 内径 ４０ｍｍ ， 高 ２５ｍｍ ； 干燥器 。 ４ ． ５ ． ２ 　 测定方法 将称量瓶放入烘箱中烘 １ｈ ， 取出置于干燥器内冷却至室温 ， 称量 （ 精确至 ０．０００１ｇ ）。 重复上述步骤 ， 直至称量瓶恒重为止 。 在瓶内放置 １ｇ 试样 ， 铺平 ， 称量 （ 精确至 ０．０００１ｇ ）， 将称量瓶放入烘箱 ， 不加盖 ， 烘 ２ｈ 后 ， 取出并放入干燥器中冷却至室温 ， 称量 （ 精确至 ０．０００１ｇ ）。 ４ ． ５ ． ３ 　 计算 试样中干燥减量按式 （ ２ ） 计算 ： 狑 ２ ＝ 犿 １ － 犿 ２ 犿 × １００ …………………………（ ２ ） 　　 式中 ： 狑 ２ ——— 试样中干燥减量 ， 以百分数 （ ％ ） 表示 ； 犿 １ ——— 试样和称量瓶烘干前的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）； 犿 ２ ——— 试样和称量瓶烘干后的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）； 犿 ——— 试样的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）。 ４ ． ５ ． ４ 　 允许差 两次平行测定结果之相对偏差