书 书 书犐犆犛 ６５ ． ０２０ ． ０１ 犆犆犛犅 １６ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ４０６２４ — ２０２１ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B 犇犲狋犲犮狋犻狅狀犪狀犱犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳 犇犻犪狆犺犪狀犻犪狀犻狋犻犱犪犾犻狊 （ 犛狋狅犾犾 ） ２０２１  １０  １１ /G2C /G2D ２０２２  ０５  ０１ /G2E /G2F /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G27 /G28 /G29 /G2A /G33 /G2F /G30 /G34 /G35 /G36 /G2C /G2D书 书 书前 　　 言 　　 本文件按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２０２０ 《 标准化工作导则 　 第 １ 部分 ： 标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由全国植物检疫标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２７１ ） 提出并归口 。 本文件起草单位 ： 浙江省检验检疫科学技术研究院 、 杭州海关 、 青岛海关技术中心 、 山西农业大学 、 拱北海关技术中心 。 本文件主要起草人 ： 吴志毅 、 陈鹏程 、 魏晓棠 、 徐淼锋 、 张志伟 、 黄凌哲 、 程帆 、 任琰 、 田红伟 、 方文渊 、 吴颖 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ４０６２４ — ２０２１ 黄瓜绢野螟检疫鉴定方法 １ 　 范围 本文件规定了黄瓜绢野螟 犇犻犪狆犺犪狀犻犪狀犻狋犻犱犪犾犻狊 （ Ｓｔｏｌｌ ） 的形态学检疫鉴定方法 。 本文件适用于黄瓜绢野螟的检疫和鉴定 。 ２ 　 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件 。 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 横带 　 犳犪狊犮犻犪 横线 鳞翅目昆虫贯穿前后翅面的带或线 。 注 ： 最常见的有前中带 （ 线 ）、 中带 （ 线 ）、 后中带 （ 线 ）、 外缘带 （ 线 ） 等 。 ３ ． ２ 背兜 　 狋犲犵狌犿犲狀 鳞翅目昆虫雄性外生殖器中大而骨化的屋脊状或头巾状结构 ， 由腹部第 ９ 背板和第 １０ 背板前面部分组成 。 ３ ． ３ 爪形突 　 狌狀犮狌狊 鳞翅目昆虫雄性外生殖器背兜后伸的中背突起 ， 由腹部第 １０ 背板后端形成 。 ３ ． ４ 囊形突 　 狊犪犮犮狌狊 鳞翅目雄虫外生殖器中 ， 第 ９ 腹节腹板 （ 基腹弧 ） 的中部向前伸入腹部形成的囊状构造 ， 常骨化较强 。 ３ ． ５ 抱器瓣 　 狏犪犾狏犪犲 （ 单数 狏犪犾狏犪 ） 鳞翅目昆虫雄性外生殖器瓣状的成对抱握器官 ， 着生于第 ９ 腹节上 。 ３ ． ６ 抱器背 　 犮狅狊狋犪 鳞翅目昆虫雄性外生殖器抱器瓣背缘的骨化纵带 。 ３ ． ７ 抱器背基突 　 狋狉犪狀狊狋犻犾犾犪 鳞翅目昆虫雄性外生殖器连接两个抱器背的横带状骨化结构 。 １ 犌犅 ／ 犜 ４０６２４ — ２０２１ ３ ． ８ 抱器腹 　 狊犪犮犮狌犾狌狊 鳞翅目昆虫雄性外生殖器抱器瓣腹缘的骨化纵带 。 ３ ． ９ 阳茎 　 犪犲犱狅犲犪犵狌狊 鳞翅目昆虫雄性外生殖器 ， 位于第 ９ 腹节内凹形成的生殖腔内 、 稍骨化的管状构造 。 ３ ． １０ 囊突 　 狊犻犵狀狌犿 鳞翅目雌性外生殖器交配囊上的高度骨化的刺状或其他形状的几丁质构造 ， １ 个或数个 。 ３ ． １１ 味刷 　 犮狅狉犲犿犪 鳞翅目雄虫腹部末端第 ８ 腹节 、 第 ９ 腹节节间膜上着生的鳞毛丛 ， 用于释放雄性信息素 。 ３ ． １２ 毛序 　 犮犺犪犲狋狅狋犪狓狔 昆虫幼虫体表刚毛在体节的排列方式 。 ４ 　 黄瓜绢野基本分类信息 中文名 ： 黄瓜绢野螟学名 ： 犇犻犪狆犺犪狀犻犪狀犻狋犻犱犪犾犻狊 （ Ｓｔｏｌｌ ， １７８２ ） 异名 ： 犇犻犪狆犺犪狀犻犪狏犻狋狉犪犾犻狊 Ｈüｂｎｅｒ ， １８１８ ； 犘犺犪犾犪犲狀犪狀犻狋犻犱犪犾犻狊 Ｓｔｏｌｌ ， １７８１ ； 犕犪狉犵犪狉狅狀犻犪狀犻狋犻犱犪犾犻狊 Ｃｒａｍｅｒ ， １７８２ 英文名 ： Ｐｉｃｋｌｅｗｏｒｍ ， Ｃｕｃｕｍｂｅｒｗｏｒｍ 分类地位 ： 属鳞翅目 Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ ， 螟蛾科 Ｐｙｒａｌｉｄａｅ ， 斑野螟亚科 Ｓｐｉｌｏｍｅｌｉｎａｅ ， 绢野螟属 犇犻犪狆犺犪狀犻犪 Ｈüｂｎｅｒ 。 黄瓜绢野螟是我国进境检疫性有害生物之一 ， 以幼虫取食 、 钻蛀寄主植物果实及花等造成危害 。 绢野螟属在全世界已知有 １００ 余种 ， 属内黄瓜绢野螟的常见近似种主要有 犇犻犪狆犺犪狀犻犪犪狉狅犪犾犻狊 、 犇 ． 犮犾犪狏犪狋犪 、 犇 ． 犺犲犿犻犮犻狋狉犪犾犻狊 、 瓜绢野螟 犇 ． 犻狀犱犻犮犪 、 褐翅绢野螟 犇 ． 狀犻犵狉犻犫犪狊犪犾犻狊 、 黄杨绢野螟 犇 ． 狆犲狉狊狆犲犮狋犪犾犻狊 和 犇 ． 狆狉犪狓犻犪犾犻狊 等 。 该虫主要以幼虫 、 蛹随寄主植物及其包装材料运输而进行远距离传播 。 黄瓜绢野螟的寄主 、 地理分布和生物学特性等信息 ， 见附录 Ａ 。 ５ 　 方法原理 黄瓜绢野螟的为害状 、 生物学特性和传播方式是确定现场检疫方式的主要依据 ， 成虫形态特征是进行种类鉴定的主要依据 。 如利用成虫外部形态特征判定其种类仍有疑问时 ， 需进一步解剖制作成虫外生殖器玻片标本 ， 用生物显微镜观察 ， 根据外生殖器形态特征对种类进行判定 。 ６ 　 器材和试剂 ６ ． １ 　 器材 体视显微镜 、 生物显微镜 、 培养箱 、 扩大镜 、 镊子 、 剪子 、 昆虫解剖针 、 小毛笔 、 指形管 、 三角纸袋 、 样品袋 、 养虫盒 、 培养皿 、 昆虫针 、 展翅板 、 硫酸纸 、 三级台 、 标签纸 、 载玻片 、 盖玻片 、 烧杯 、 量筒等 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ４０６２４ — ２０２１ ６ ． ２ 　 试剂 氢氧化钠或氢氧化钾 、 蒸馏水 、 二甲苯 、 霍氏封固液或加拿大树胶 （ 显微镜用 ）、 无水乙醇 、 乙醇  甘油 保存液 （ １００ｍＬ７５％ 乙醇 ， 加入 ０．５ｍＬ ～ １ｍＬ 甘油 ）。 ７ 　 检疫与培养 ７ ． １ 　 现场检疫 首先确定进境瓜果等寄主货物是否来自或过境黄瓜绢野螟疫区 ， 如是 ， 则需进行现场详细检查 。 根 据黄瓜绢野螟的为害状 （ 见图 Ａ．１ 、 图 Ａ．２ ）， 详细检查寄主植物可能携带的幼虫 、 蛹或成虫等 。 注意检查寄主花 、 芽 、 茎表面是否有食痕和昆虫排泄物 ， 果实 、 花等表面是否有蛀孔 、 虫粪等 。 同时详细检查寄 主植物包装材料 、 运输工具表面及缝隙处是否有老熟幼虫或蛹 ， 如有 ， 则进行现场取样 ， 并根据形态初步判定是否疑似黄瓜绢野螟 ， 按照附录 Ｂ 和附录 Ｃ ， 将检查获得的幼虫或蛹连同寄主植物一起放入样品 袋 ， 老熟幼虫和蛹可单独放入指形管 ， 将获得的成虫装入三角纸袋再放入样品袋 。 做好虫样的标识及记录 ， 带至实验室进一步确认 。 ７ ． ２ 　 培养 将幼虫连同寄主植物一起放入养虫盒 ， 蛹通常单独放入盛有已消毒湿细沙的培养皿 ， 将养虫盒 、 培 养皿置于培养箱内 ， 在温度范围 ２５℃ ～ ３０℃ 、 相对湿度分别为 ７０％ ～ ８０％ （ 幼虫 ） 和 ６０％ ～ ７０％ （ 蛹 ） 的条件下 ， 将幼虫 、 蛹培养至成虫 。 ８ 　 标本的制备 ８ ． １ 　 成虫针插标本 用小毛笔 、 镊子 、 硫酸纸和昆虫针 ， 通过三级台 、 展翅板将成虫制成针插标本 。 干成虫样品需回软后 制作 。 ８ ． ２ 　 成虫外生殖器玻片标本 将成虫腹部取下 ， 浸泡在盛有 １０％ 氢氧化钠水溶液烧杯中 ， 煮沸 ３ｍｉｎ ～ ５ｍｉｎ ， 取出解剖 ， 去掉与 外生殖器无关的体壁 、 肌肉 、 内脏等 ， 再放到 ７５％ 、 ８５％ 、 ９５％ 和 １００％ 乙醇中各 １０ｍｉｎ ， 最后置于二甲苯中透明 ， 体视显微镜下整姿 ， 尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像 ， 再放到载片上 ， 滴加拿大树 胶 ， 盖片风干 ， 加贴标签 ， 制成玻片标本 。 ９ 　 实验室鉴定 ９ ． １ 　 斑野螟亚科的特征 喙发达 。 下唇须发达 ， 通常弯曲上举 ， 少数平伸 。 触角丝状 ； 缺毛隆 。 前翅第三径脉 Ｒ ３ 和第四径 脉 Ｒ ４ 共柄 ， 第二径脉 Ｒ ２ 与共柄的第三 、 四径脉 Ｒ ３＋４ 靠近或共柄 ， 第五径脉 Ｒ ５ 游离 ， 第二臀脉 ２Ａ 与第 一臀脉 １Ａ 通常形成一封闭的环 。 后翅共柄的亚前缘脉和第一径脉 Ｓｃ＋Ｒ １ 与径分脉 Ｒｓ 共柄 。 前 、 后 翅第二中脉 Ｍ ２ 和第三中脉 Ｍ ３ 从中室后角发出 。 听器间突双叶状 。 雄性外生殖器爪形突通常发达 ， 形状多变 ； 颚形突通常无 ； 无抱器内突 。 雌性外生殖器囊突有或无 ， 若有则形状多变 ， 但不为菱形 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ４０６２４ — ２０２１ ９ ． ２ 　 绢野螟属的鉴别特征 体细长有光泽 ， 翅有光泽如丝绢 ； 前翅狭三角形 ， 后翅宽呈三角形 。 额圆或扁平 ， 下唇须宽阔 ， 略斜向上伸 ， 第 ３ 节稍前伸 ， 不明显 ； 下颚须末节鳞片扩展 。 前翅中室约为翅长的一半 ， 第一径脉 Ｒ １ 出自中室前缘 ４ ／ ５ 处 ， 第三径脉 Ｒ ３ 与第四径脉