ICS65.020.30 CCSB45 2201 长春市地方标准 DB2201/T64—2024 梅花鹿布鲁氏菌病胶体金免疫层析检测方 法 Specificationforthedetectionofcolloidalgoldteststripsforsikadeerbrucellosis 2024-12-30发布 2025-02-07实施 长春市市场监督管理局  发布DB2201/T64—2024 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由长春市乾艺生物科技研究院提出。 本文件由长春市畜牧业管理局归口。 本文件起草单位：长春市乾艺生物科技研究院、吉林省畜牧兽医科学研究院、吉林农业大学。 本文件主要起草人：田来明、权心娇、田贺实、赫雪、田怡豪、王凯立、王向辉、尚丽元、高启臣、 张鸿、赵春梅。DB2201/T64—2024 2梅花鹿布鲁氏菌病胶体金免疫层析检测方法 1范围 本文件给出了梅花鹿布鲁氏菌病胶体金免疫层析的试验原理和检测方法，规定了仪器设备、试剂与 材料、样品处理、样品检测及结果判定。 本文件适用于梅花鹿布鲁氏菌病抗体的初筛。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 通过筛选特异性抗原进行对比，将胶体金作为示踪标志物，将抗原或抗体固定在硝酸纤维素膜上， 然后添加待检样品和缓冲液，使待检物质在膜上迁移并发生免疫反应，从而实现定性检测。 5仪器设备 离心机，转速≥3000rpm。 6试剂与材料 鹿布鲁氏菌病抗体胶体金免疫层析试纸条。 采血管。 EP管。 PBS（0.01MpH7.2）。 7样品处理 采集全血于采血管中，管上标记好鹿只编号，将采血管放入装有冰袋的保温箱中保存。填写采样 单，注明样品编号、鹿场名称、采集地点、采集时间等信息。 血样3000rpm离心5min获得血清，置于EP管中待检；暂不检测的血清样品于-80℃保存。 样品需要运输时，应做好包装。 8样品检测DB2201/T64—2024 3 室温下，样品用PBS液1倍～2倍稀释。 试纸条水平放置，用一次性滴管向加样孔内垂直滴入2滴～4滴待测样品。 加样后计时，8min～10min读取检测结果。 9结果判定 检测成立条件 在试纸条质控线“C”的位置出现一条反应指示条带，判定检测结果成立，否则结果不成立。 结果判定 在检测成立条件下，进行判定如下： a）出现两条反应指示条带，一条位于质控线“C”的位置，另一条位于检测线“T”的位置，判为 阳性； b）只出现一条反应指示条带，位于质控线“C”的位置，而在检测线“T”的位置无反应指示条带， 判为阴性。