ICS65.020.30 CCSB41 2201 长春市地方标准 DB2201/T70—2024 非洲猪瘟病毒环境监测采样技术规范 TechnicalspecificationforenvironmentalmonitoringsamplingofAfricanswine fevervirus 2024-12-30发布 2025-02-07实施 长春市市场监督管理局  发布DB2201/T70—2024 Ⅰ前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由长春市畜牧业管理局提出并归口。 本文件起草单位：长春市动物疫病预防控制中心。 本文件主要起草人：张寰波、于丹、马由诏、董玉光、胡诗悦、岳洋、蒋苹苹、王建超、唐荧、邹 娟、徐莉。DB2201/T70—2024 1非洲猪瘟病毒环境监测采样技术规范 1范围 本文件规定了非洲猪瘟病毒环境监测采样的对象、物资和人员、场点与数量、样品采集、样品保存、 包装及运输、废弃物处理的相关要求。 本文件适用于非洲猪瘟病毒环境监测样品的采集、运输和保存。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4采样对象 养殖场（户）、屠宰场、无害化处理厂、运输车辆、农贸（集贸）市场以及相关从业人员。 5物资和人员要求 5.1物资 5.1.1材料类的应包括采样单、笔和记号笔、拭子（推荐使用聚丙烯材质拭子或尼龙材质拭子）、离 心管、高压灭菌袋、样品袋、冰袋、冷藏运输箱、生物安全垃圾袋等。 5.1.2防护类的应包括生物安全防护服、防护镜、口罩、一次性乳胶手套、防护靴等。 5.1.3保存液应使用0.01mol/L(pH：7.2～7.4)PBS保存液。 5.2人员 5.2.1采样人员14日内未曾去过非洲猪瘟疫情场。 5.2.2采样人员要具有专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。 5.2.3现场采样至少由两名工作人员完成，同一时段不同场点安排不同的采样人员，避免交叉污染。 5.2.4人员进场顺序从净区到污区，不应逆流。 5.2.5采样人员应穿防护服、鞋套，佩戴手套、口罩等防护用品，必要时戴护目镜或面罩，做好个人 防护。 6采样场点与数量DB2201/T70—2024 26.1养殖场（户） 6.1.1场外环境样品 场外环境样品采集包括但不限于表1的规定。 表1场外环境样品采集点、采样数量 采样区域 采样点 采样数量 猪场外1公里 范围场门口路面随机选3个点 每个采样点随机采集1 份～2份样品车辆入场处随机选5个点 运猪车往来的公路路面上随机选5个点 6.1.2舍内环境样品 舍内环境样品采集包括但不限于表2的规定。 表2舍内环境样品采集点、采样数量 采样区域 采样点 采样数量 墙壁 猪只出入近处，尤其破损掉皮不易清洗处，随机选3个点 每个采样点随 机采集1份～ 2份样品过道 猪舍入口处、过道中凸凹不平不易清洗处，随机选3个～5个点 猪栏地面及栏杆 栏内四角和中央位置及栏杆底部 料槽、水槽、水嘴 槽子周边、底部包括槽内饲料、水嘴出水口 生产用具 扫帚、铁锹、挡板、上料的推车 通风系统 所有风机叶片、防护网窗口各随机选2个点 粪沟 四角及中央位置 6.1.3舍外环境样品 舍外环境样品采集包括但不限于表3的规定。 表3舍外环境样品采集点、采样数量 采样区域 采样点 采样数量 道路尤其坑洼不平不易清洁消毒处，净道随机选3个点、污道随机选 5个点 每个采样点随 机采集3份～ 5份样品出猪通道 地面及两侧壁面 出猪台 台面、侧壁、挡板 饲料生产车间 墙壁、地面、饲料混合搅拌机 药房 地面、墙壁、门把手、药品保存架、窗户、桌椅 疫苗储藏室 地面、墙壁、门把手 办公室、门卫 地面、墙壁、门把手、窗户、桌椅 淋浴房 每个区域入口处地面，更衣室地面、衣柜、鞋柜 消毒点洗消工具 高压水枪、喷雾式消毒器DB2201/T70—2024 36.1.4场内运输车辆环境 运猪车、运料车、铲车、垃圾车：车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中央、车厢 挡板、轮胎及轮胎缝隙、铲车铲斗的正面和背面等，随机多点采样。 6.1.5水源采样 水塔、水箱、水井或其他水源，分别取样1mL。 6.1.6餐厨垃圾 餐厨垃圾桶中有肉一定取肉，垃圾桶中随机多点采样，液体垃圾每个点位取样1mL。 6.1.7环境中的虫媒 捕捉猪场中的虫媒，将其放入刺有透气孔的自封袋中。 6.2屠宰场 6.2.1屠宰场外 屠宰场外环境样品采集按表1执行。 6.2.2屠宰场内 6.2.2.1待宰圈内墙、过道、猪栏地面及栏杆环境样品采集 待宰圈内墙、过道、猪栏地面及栏杆环境样品采集按表2执行。 6.2.2.2屠宰、生产车间及产品仓库环境样品采集 屠宰、生产车间及产品仓库样品采集包括但不限于表4的规定。 表4屠宰、生产车间及产品仓库采样点、采样数量 采样区域 采样点 采样数量 生产车间地面、墙壁、地沟、接血槽 每个采样点随机采集3 份～5份样品生产线台面、吊钩、切割机械表面 分割刀、案板、托盘 产品仓库 地面（不易清洗处重点采样）、墙面、产品外包装 6.3无害化处理厂 6.3.1厂门口路面、车辆入厂处、无害化处理车辆往来路面上的环境样品采集按表1执行。 6.3.2运送车辆环境样品采集包括但不限于：车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中 央、车厢挡板、铲车铲斗的正面和背面，每个采样点随机采集3份～5份样品。 6.3.3无害化处理车间环境样品采集包括但不限于：地面、冷库地面、处理设备表面，每个采样点随 机采集3份～5份样品。 6.4农贸（集贸）市场 农贸（集贸）市场环境样品采集包括但不限于表5的规定。DB2201/T70—2024 4表5农贸（集贸）市场环境样品采样点、采样数量 采样区域 采样点 采样数量 市场猪肉摊床 设施、用具地面、通道 每个采样点随机采 集3份～5份样品台面、刀器具、案板、磅秤 存放肉品的冰箱（柜）内部、表面 摊位污水排水口 各类物体表面垃圾车、垃圾桶、拖布等清洁工具，转运物品的拖车 门把手、楼梯扶手、卫生间等公用设备设施表面，潮湿的公共通道和卫生间地 面、地漏、拖布池 6.5生猪运输车辆 环境样品采集包括但不限于：车门把手、车门两侧脚踏板、驾驶室地面及脚踏板、车厢四角及中央、 车厢挡板、轮胎及轮胎缝隙，多点采样。每个采样点随机采集3份～5份样品。 6.6人员 各类人员样品采集包括但不限于表6的规定。 表6各类人员样品采样点、采样数量 采样人员 采样点 采样数量 猪场工作人员：门卫、饲养员、技术员、场内运 输车辆人员、厨房工作人员等 手心、手背、头发、指甲缝等身体部位，所穿的衣 服、帽子、手套、鞋底及随身携带的手机、眼镜、 戒指、手表等密切接触物品，均用浸过PBS的拭子 刮取采样。每个采样点随 机采集1 份～2份样品屠宰场工作人员：屠宰工人、分割工人等 无害化处理厂工作人员 生猪运输人员 农贸（集贸）市场工作人员 7样品采集 7.1方法 7.1.1环境拭子样品 戴一次性的乳胶手套，用灭菌的PBS保存液，将2个无菌采样拭子头完全浸湿，在采样部位均匀涂 抹3次～5次后，将拭子头放入含有1mL～2mL的灭菌PBS保存液离心管中。 7.1.2环境液体样品 用无菌吸管吸取被检液体1mL，放入灭菌离心管中。 7.1.3环境固体样品 餐厨垃圾中的肉，采集2.0g～5.0g大小的样品装入灭菌离心管中。 7.2操作要求与记录DB2201/T70—2024 57.2.1采样操作要求 拭子样本采样过程中，拭子只能接触当前采集的物体，避免碰触到其他物体。采样结束后，按照生 物安全要求脱去防护服等个人防护装备，清理好废弃物，做好场地、物品消毒和无害化处理后离场。 7.2.2采样记录 样品采集过程中应填写表A.1。 8样品保存、包装及运输 按照《高致病性动物病原微生物菌(毒)种运输包装规范》规定执行。 9废弃物处理 按NY/T541规定执行。 AADB2201/T70—2024 6附录A （资料性） 非洲猪瘟环境监测样品采样记录表 非洲猪瘟环境监测样品采样记录表见表A.1。 表A.1非洲猪瘟环境监测样品采样记录表 市（州） 县（市、区） 乡（镇） 村 共页第页 场户名称样品 来源规模 散养 屠宰 交易 运输 其它是否饲喂泔水 是否 联系人及电话 经度 纬度 样品名称血清 拭子 O-P液组织 环境 其它 场点启用时间 年龄/日龄 样品总量 样品保存及运输条件 户主姓名存栏数 样品名称 样品数量 样品编号 采样位置 备注 注1：场户名称一栏不仅限于规模养猪场户也可填写屠宰场/无害化处理厂/农贸（集贸）市场名称等。 注2：户主姓名一栏填写的内容可以是猪散养户户主姓名/备案车辆车牌号/摊位号等。 采样人签字： 被采样单位签字： 采样时间：年月日