ICS65.020.30 CCSB44 23 黑龙江省地方标准 DB23/T3871—2024 实验动物SPF鸭遗传质量控制规范 2024-08-30发布 2024-09-29实施 黑龙江省市场监督管理局  发布DB23/T3871—2024 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省科学技术厅提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。 本文件主要起草人：高彩霞、夏长友、王伟、于海波、李昌文、张贺、陈洪岩、杨鸣发。DB23/T3871—2024 1实验动物SPF鸭遗传质量控制规范 1范围 本文件规定了SPF鸭遗传质量控制的形态外观检查、封闭群的命名、繁殖方法和遗传质量监测。 本文件适用于SPF鸭封闭群的遗传质量控制。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB14923—2022实验动物遗传质量控制 GB/Z34792实验动物引种技术规程 NY/T1673—2008畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程 DB23/TXXXX实验动物SPF鸭饲养繁育规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 封闭群 不引进外部动物、在群体内随机选择种动物进行繁殖，以维持有限杂合度的实验动物种群。 [来源：GB14923—2022，3.13]。 4形态外观检查 直接观察SPF鸭体型、外貌、羽毛等，应符合品种特征，并记录。 5封闭群的命名 封闭群的命名应按照GB14923—2022中4.2.2规定执行。 6繁殖方法 6.1原则 封闭繁殖，保持SPF鸭的遗传异质性及基因多态性，避免近交系数随繁殖代数增加而过快上升。DB23/T3871—2024 26.2引种 作为繁殖用原种的封闭群应三代以内无共同亲代，并符合GB/Z34792对封闭群动物引种的技术要 求。SPF鸭引种应引入SPF鸭种蛋，种蛋数量不少于1000枚。 6.3繁殖 SPF鸭的饲养繁育按照DB23/TXXXX规定执行，交配方法按照GB14923规定执行。 7遗传质量监测 7.1遗传质量要求 7.1.1形态外观应符合品种特征。 7.1.2应有完整的遗传背景资料。 7.1.3遗传谱系和记录卡内容清楚完整。 7.2遗传检测方法（微卫星DNA标记法） 采用微卫星DNA标记检测方法，按照NY/T1673—2008中5的规定执行。SPF鸭封闭群微卫星DNA标记 位点按照附录A规定选择。 7.3检测频率 每世代每年至少检测1次。 7.4抽样 7.4.1从每个种群中随机抽取非同胞成年鸭，采集血液或其他组织。 7.4.2种群数量小于100羽的群体，抽样不少于15羽，大于等于100羽的群体，抽样不少于30羽。抽 样应雌雄各半。 7.5结果判定 数据统计分析与判定按照NY/T1673—2008中6的规定执行。SPF鸭封闭群遗传质量采用平均遗传 杂合度进行评价，当群体平均遗传杂合度在0.5～0.7时，该群体判为合格，否则判为不合格。DB23/T3871—2024 3附录A （规范性） SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点 SPF鸭封闭群遗传质量的微卫星DNA标记位点为26个，相关信息应符合表A.1规定。 表A.1SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点 位点 引物序列（5'～3'）退火温度 （℃）最大等位基 因数等位基因分布范围 （bp） APL2GATTCAACCTTAGCTATCAGTCTCC CGCTCTTGGCAAATGTCC58.5 4 115～125 APL579ATTAGAGCAGGAGTTAGGAGAC GCAAGAAGTGGCTTTTTTC55 7 118～227 APH09GGATGTTGCCCCACATATTT TTGCCTTGTTTATGAGCCATTA58 8 93～188 APH11GGACCTCAGGAAAATCAGTGTA GCAGGCAGAGCAGGAAATA58.5 2 183～185 APH18TTCTGGCCTGATAGGTATGAG GAATTGGGTGGTTCATACTGT58 3 179～324 AY258ATGTCTGAGTCCTCGGAGC ACAATAGATTCCAGATGCTGAA58.1 9 90～161 AY264GCAGACTTTTACTTATGACTC CTTAGCCCAGTGAAGCATG58.1 11 112～328 AY314CTCATTCCAATTCCTCTGTA CAGCATTATTATTTCAGAAGG50.3 3 135～250 CAUD001ACAGCTTCAGCAGACTTAGA GCAGAAAGTGTATTAAGGAAG55.5 2 234～390 CAUD002CTTCGGTGCCTGTCTTAGC AGCTGCCTGGAGAAGGTCT60.8 4 175～231 CAUD004TCCACTTGGTAGACCTTGAG TGGGATTCAGTGAGAAGCCT60.8 3 162～290 CAUD005CTGGGTTTGGTGGAGCATAA TACTGGCTGCTTCATTGCTG60.8 3 180～300 CAUD006ATGGTTCTCTGTAGGCAATC TTCTGCTTGGGCTCTTGGA63.5 8 183～248 CAUD007ACTTCTCTTGTAGGCATGTCA CACCTGTTGCTCCTGCTGT60.8 6 100～208 CAUD010GGATGTGTTTTTCATTATTGAT AGAGGCATAAATACTCAGTG50.3 9 180～300DB23/T3871—2024 4表A.1SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点(续) 位点 引物序列（5'～3'）退火温度 （℃）最大等位基 因数等位基因分布范围 （bp） CAUD011TGCTATCCACCCAATAAGTG CAAAGTTAGCTGGTATCTGC50.3 6 137～222 CAUD012ATTGCCTTTCAGTGGAGTTTC CGGCTCTAAACACATGAATG63.5 9 182～286 CAUD014CACAACTGACGGCACAAAGT CTGAGTTTTTCCCGCCTCTA58.1 3 136～200 CAUD026ACGTCACATCACCCCACAG CTTTGCCTCTGGTGAGGTTC60.8 9 134～196 CAUD027AGAAGGCAGGCAAATCAGAG TCCACTCATAAAAACACCCACA66 5 100～180 CAUD028TACACCCAAGTTTATTCTGAG ACTCTCCAGGGCACTAGG55.5 8 153～220 CAUD031AGCATCTGGACTTTTTCTGGA CACCCCAGGCTCTGAGATAA51.4 10 140～187 CAUD032GAAACCAACTGAAAACGGGC CCTCCTGCGTCCCAATAAG58.1 9 96～206 CAUD034TACTGCATATCACTAGAGGA TAGGCATACTCGGGTTTAG55.5 9 160～296 CAUD035GTGCCTAACCCTGATGGATG CTTATCAGATGGGGCTCGGA63.5 7 174～282 CMO212CTCCACTAGAACACAGACATT CATCTTTGGCATTTTGAAG58 3 186～272