ICS65.020.20 CCSB38 5107 四川省（绵阳市）地方标准 DB5107/T157—2025 天麻"两菌"--萌发菌、蜜环菌菌种生产技术 规程 2025-02-13发布 2025-03-01实施 绵阳市市场监督管理局  发布DB5107/T157—2025 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4厂房建设............................................................................1 5设施设备............................................................................1 6菌种生产工艺流程....................................................................1 7菌种生产............................................................................1 8检查................................................................................3 9记录................................................................................3 10入库...............................................................................3 11留样...............................................................................4 附录A（规范性）萌发菌及蜜环菌原种培养基配方..........................................5 附录B（规范性）萌发菌及蜜环菌栽培种培养基配方........................................6DB5107/T157—2025 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由绵阳市农业科学研究院提出。 本文件由绵阳市农业农村局归口。 本文件起草单位：绵阳市农业科学研究院、平武县中医药产业服务中心、平武县农业农村局。 本文件主要起草人：黎倩、钟钼芝、陈小敏、张跃非、陈杰、戴维、赵丹、叶坤浩、王钧、赖强龙、 徐大东、雍光玖、徐婷、闵翔、苏绍艳、张瀚。DB5107/T157—2025 1天麻"两菌"--萌发菌、蜜环菌菌种生产技术规程 1范围 本文件规定了天麻“两菌”—萌发菌和蜜环菌菌种生产的术语和定义、厂房建设、设施设备、菌种 生产工艺流程、菌种生产、检查、记录、入库、留样。 本文件适用于绵阳市行政区域内天麻产区萌发菌菌种和蜜环菌菌种的生产。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T12728食用菌术语 GB14881食品安全国家标准食品生产通用卫生规范 NY/T528食用菌菌种生产技术规程 NY/T1742食用菌菌种通用技术要求 DB5107/T116地理标志产品平武天麻 3术语和定义 GB/T12728和DB5107/T116界定的术语和定义适用于本文件。 4厂房建设 选择地势高、通风良好、给排水通畅、交通便利的场地。配备有相互隔离的原材料仓库、拌料装袋 间、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、菌种检验室、菌种贮存室等。选址和厂区环境、厂房和车间应 符合GB14881的规定。 5设施设备 设施设备应符合GB14881和NY/T528相关规定。 6菌种生产工艺流程 培养基制备→分装→灭菌→冷却→接种→培养（检查）→成品。 7菌种生产 7.1母种DB5107/T157—2025 27.1.1获取方式 天麻“两菌”的母种可以通过引进和野生资源收集与分离两种方式获取。 7.1.2引进 7.1.2.1萌发菌 萌发菌母种应菌丝洁白、致密、均匀、平整，背面无色素沉淀，边缘整齐。母种感官要求应符合NY/T 1742的规定。 7.1.2.2蜜环菌 蜜环菌母种应为气生菌丝扭结形成的棕红色菌索，基内菌丝为白色菌索，偶有少量棕色分泌物，幼 嫩菌索在暗处发出白色荧光。母种感官要求应符合NY/T1742的规定。 7.1.3野生资源收集与分离 7.1.3.1萌发菌 7.1.3.1.1每年5月至6月，在野生天麻产区收集湿润的枯枝落叶，与天麻花粉拌匀后，覆土培养， 保持土壤湿度60%～65%，60 d后获得含有萌发菌的原球茎。 7.1.3.1.2严格按无菌操作，将原球茎用1%的氯化汞溶液浸泡杀菌0.5 min～1 min，再用无菌水清洗 3次，吸干水分，接种于符合NY/T528规定的PDA培养基上。恒温培养箱内25 ℃避光培养，萌发后挑 取尖端菌丝进行纯化。 7.1.3.2蜜环菌 7.1.3.2.1在野生天麻产区收集带蜜环菌菌索块茎。 7.1.3.2.2严格按无菌操作，将天麻块茎用1 %的氯化汞溶液浸泡杀菌0.5 min～1 min，再用无菌水清 洗3次，吸干水分，切成长宽各1 cm左右的小块，接种于符合NY/T528规定的PDA培养基上。恒温培 养箱内25 ℃避光培养，萌发后挑取尖端菌丝进行纯化。 7.2原种 7.2.1萌发菌及蜜环菌培养基制备 按照附录A中规定的配方，将原材料充分预湿混匀。 7.2.2分装 将制备好的培养基分装至500 mL的原种瓶瓶颈处，培养基填装要松紧适度，中间打一直径1.6 cm～ 1.8 cm，深2 cm～3 cm的通气孔，盖上透气盖。 7.2.3灭菌 将分装好的原种瓶放入灭菌锅灭菌。高压灭菌压力为0.14 MPa～0.15 MPa，温度为121 ℃～125 ℃， 灭菌2 h。 7.2.4冷却 将灭菌后原种瓶搬入清洁、消毒后的冷却室，自然冷却至室温。 7.2.5接种DB5107/T157—2025 3严格按无菌操作，在超净工作台或接种箱内，挑取长宽各1.5 cm左右的母种块，接种于通气孔内， 贴上标签记录菌种名称和接种时间。 7.2.6培养 将接种好的原种瓶放置于培养室，控制室温23 ℃～25 ℃，空气相对湿度60%～70%，通风、避光培 养。一般培养40 d～45 d萌发菌菌丝即可长满原种瓶，30 d～35 d蜜环菌菌丝即可长满原种瓶。 7.3栽培种 7.3.1萌发菌及蜜环菌培养基制备 按照附录B中规定的配方，将原材料充分预湿混匀。 7.3.2分装 将制备好的培养基分装至14 cm×28 cm的栽培袋中。培养基填装要松紧适度，分装至距袋口5 cm处， 中间打一直径1.6 cm～2.2 cm，深6 cm～8 cm的通气孔，盖上透气盖。 7.3.3灭菌 将分装好的栽培袋放入灭菌锅灭菌。高压灭菌压力为0.14 MPa～0.15 MPa，温度为121 ℃～125 ℃， 灭菌2 h～3 h；常压灭菌时快速升温至100 ℃以上，灭菌10 h～15 h。 7.3.4冷却 将灭菌后的栽培袋搬入清洁、消毒后的冷却室，自然冷却至室温。 7.3.5接种 严格按无菌操作，在超净工作台或接种箱内，将原种块填满栽培袋通气孔，贴上标签注明菌种名称 和接种时间。 7.3.6培养 将接种好的栽培袋放置于培养室，控制室温23 ℃～25 ℃，空气相对湿度60%～70%，通风、避光培 养。一般培养66 d～82 d萌发菌菌丝即可长满栽培袋，34 d～46 d蜜环菌菌丝即可长满栽培袋。 8检查 培养期间应定期检查，及时剔除长势差、长速慢、感染、发臭等不合格菌种。母种、原种和栽培种 感官要求应符合NY/T1742的规定。 9记录 应详细记录生产的各个环节，包括原材料来源、菌种来源、菌种名称、装瓶/袋日期、装瓶/袋数量、 灭菌时间、接种日期、培养时间、检查情况、生产负责人。 10入库DB5107/T157—2025 4完成培养的菌种应登记好菌种名称、菌种级别、生产时间、存放位置后入库。母种于4 ℃～6 ℃、 原种和栽培种于1 ℃～4 ℃的冰箱或冷库贮存。 11留样 每批菌种都应留样备查，留样数量应为每个批次3支（瓶、袋）。母种于4 ℃～6 ℃、原种和栽培种 于1 ℃～4 ℃的冰箱或冷库贮存，直至该批菌种培育出天麻为止。